悪性神経膠腫における構造改変したα型血小板由来増殖因子受容体遺伝子発現の関与

1994 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 06771057
• Research Institution: Tohoku University
• Principal Investigator: 隈部 俊宏 東北大学, 医学部, 助手 (10250747)
• Keywords: α-PDGF Receptor / Molignant Glioma / Gene / Genomic Organization / Oncogenesity / Mutation / Gene Amplification / Overexpression

Research Abstract

1.正常α-Platelet-derived frowth factor(PDGF)receptor遺伝子構造とpromoter領域の解析
α-PDGF receptorの正常遺伝子構造を明らかにした。本遺伝子は全長65kbにおよぶ大きな遺伝子で、23個のexonを有し、翻訳開始地点が第2exonに存在していた。S1mapping,primer extension法による解析では転写開始地点が複数認められた。luciferase assayにてpromoter活性を測定したところ、転写開始地点の上流約200bpのあたりにpositive regulatory elementsが存在した。
2.変異型α-PDGF receptorの造腫瘍性の検定(in vitro)
細胞外ドメインの一部を欠失した変異型α-PDGF receptorが腫瘍形成に関わっているか否かを調べるため、NIH3T3 cellにこの遺伝子を導入しfocus formation assayを行った。この結果、変異型レセプター遺伝子を導入した細胞のみでfocusが認められた。soft agar assayにて造腫瘍性を検証中である。
3.トランスジェニックマウスの作製
我々がcloningしたhuman α-PDGF receptor本来のpromoterによってdriveされる正常ならびに変異型α-PDGF receptorのtransgeneを構築し、transgenic mouseを作製中である。さらに、導入遺伝子を脳に強く発現させるため、mouse myelin basic proteinおよびglial fibrillary acidic proteinのpromoterを連結したtransgeneもそれぞれ構築し、transgenic mouseの作製にとりかかった。

Research Products

• [Publications] Kumabe,T.et al.: "Amplification of α-platelet-derived growth factor receptor gene lacking an exon coding fora portion of the extracellula" Oncogene. 7. 627-633 (1992)
• [Publications] Kumabe,T.et al.: "Overexpression and amplification of alfa-PDGF receptor gene lacking exons coding for a portion of the extracellular" Tohoku J.Exp.Med.168. 265-269 (1992)