1994 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
06771169
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Research Institution | Toho University |
Principal Investigator |
武者 芳朗 東邦大学, 医学部, 助手 (40229927)
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Keywords | 脊柱靭帯骨化症 / estrogen receptor / 培養細胞 / estrogen親和性 |
Research Abstract |
「目的」ヒト脊柱靭帯由来培養細胞を用いて脊柱靭帯骨化症患者と非骨化症患者とのestrogenに対する親和性、及びestrogen刺激に対する応答性の相違につき比較検討した。 [対象]患者の了解を得て、手術時に採取した本症患者12例の脊柱靭帯費骨化部(後縦靭帯8例、項靭帯4例)及びcontrolとして非骨化症患者10例の脊柱靭帯(後縦靭帯8例、項靭帯2例)をmaterialとした。 [方法]本症患者及びcontrolの摘出脊柱靭帯組織をRPMI-1640 mediumにて継代培養し、3〜5代継代後の細胞を培養脊柱靭帯細胞とした。これらの培養細胞を用いてradioimmuno assay法にて3,17β-estradiolに対するreceptor binding assayを行った。さらにimunoradiometric assay法にて3,17β-estradiol添加刺激に対するBone Gla Protein産生能の変化、及び3,17β-estradiol添加刺激に対する^3H-TDR up takeの変化につき検討した。 [結果]receptor binding assayでは,本症患者由来の培養靭帯細胞内にKD値(解離定数)で平均7.3×10^<-12.1>と、control(平均7.3×10^<-9.5>)に比しより低濃度のestradiol下でも反応するhormone receptorの存在が確認された。さらに本症患者由来の培養靭帯細胞は3,17β-estradiol添加刺激によって全例^3H-TdR up takeの増加を認めた。これに対しcontrolの細胞はほぼ不変か、むしろup takeが抑制された症例も見られた。3,17β-estradiol添加刺激によるBone Gla Protein産生能の変化では、controlの培養靭帯細胞はすべて測定限界値(1ng/ml)以下であったのに対し、本症患者由来靭帯細胞の中には極微量ではあるがBone Gla Protein産生の増加を来した症例もあり、controlとは異なるestrogen応答性を示した。 [結語]以上の結果から、ヒト脊柱靭帯細胞内にestrogen receptorが存在することが確認され、脊柱靭帯骨化症患者の脊柱靭帯細胞には非骨化症患者に比し、よりestrogenに親和性の高いhormone receptorの存在が知られた。さらにestrogenはreceptorを介して靭帯細胞に直接作用し、細胞レベルでの代謝活性を促進させる可能性が示唆された。
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