1994 Fiscal Year Annual Research Report
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06772202
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
巽 圭太 大阪大学, 医学部, 助手 (00222109)
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| Keywords | TTF1 / TTF-1 / 甲状腺 / 転写因子 / 甲状腺低形成 |
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| Research Abstract |
今年度は、マウス、ヒトの甲状線特異的転写因子TTF1 cDNAのクローニングを行っている。
マウスの肺よりRNAを抽出し、RT-PCR法でTTF1 cDNAのクローニングを行っている。具体的には、TTF1遺伝子は甲状腺と肺に特異的に発現しているので、肺よりAGPC法でtotal RNAを抽出し逆転写酵素を用いてcDNAプールを合成した。これまで報告されていたラットのTTF1 cDNAより作成した蛋白コード領域の5'端と3'端に位置する一組のプライマーを用いてこのcDNAプールよりTTF1 cDNAをPCR法で増幅し、プラスミドベクターにクローニングし、塩基配列を決定し、TTF-1蛋白の5'端と3'端の各11と10アミノ酸を除く部分のcDNAの中間領域の塩基配列を同定した。この中間領域のアミノ酸配列ははラットと約99%一致していた。残る5'端と3'端の塩基配列については現在、RACE5'とRACE3'を用いてクローニング中である。甲状腺が低形成のマウスモデルであるhytマウスのcDNAも同様にRT-PCR法を利用して構造解析中である。
ヒトのTTF1 cDNAは、ヒト甲状腺のファージcDNAライブラリーよりマウスTTF1 cDNAをプローブとしてクローニング中で、現在、ファージクローンが得られ、プラスミドベクターにサブクローニングし、構造解析中である。
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[Publications] Okamoto,N: "Monoallelic expression of normal mRNA in the PIT1 mutation heterozygotes with normal phenotype and biallelic expression in the abnormal phenotype." Hum.Mol.Genet.3. 1565-1568 (1994)
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[Publications] Irie,Y: "A novel E250X mutation of the PIT1 gene in a patient with combined pituitary hormone deficiency." Endocrine J.42(印刷中). (1995)
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[Publications] 巽 圭太: "転写因子疾患" Molecular Medicine. 31. 575-577 (1994)
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[Publications] 巽 圭太: "下垂体ホルモン複合欠損症とPIT1遺伝子" Medicina. 31. 239-241 (1994)
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[Publications] 巽 圭太: "下垂体特異的転写因子Pit-1/GHF-1と先天性TSH・GH・PRL複合欠損症" 日本臨床. 52. 957-961 (1994)
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[Publications] 巽 圭太: "PIT1異常症-先天性下垂体ホルモン複合欠損症の新しい疾患単位" 医学のあゆみ. 171. 258-259 (1994)
