悪性グリオーマ浸潤リンパ球に於けるT細胞抗原レセプターの分子生物学的解析-T細胞抗原レセプター遺伝子導入による遺伝子導入による遺伝子治療の試み

1994 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 06807113
• Research Institution: Juntendo University
• Principal Investigator: 新田 泰三 順天堂大学, 医学部, 講師 (80172724)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 八木田 秀雄 順天堂大学, 医学部, 助教授 (30182306) ; 佐藤 潔 順天堂大学, 医学部, 教授 (10112707) ; 奥村 康 順天堂大学, 医学部, 教授 (50009700)
• Keywords: 悪性グリオーマ / 腫瘍浸潤リンパ球 / T細胞抗原レセプター / 遺伝子治療

Research Abstract

申請者は悪性グリオーマに於けるTIL TCR repertoireをRT-PCR法により検索し、limited heterogenityとVα7,とVβ13.1のpredominant usageを立証した(Nitta T,Science:249:672,'90,Ebato M,Immunol Lett 39:53'94)。本実験ではこれらのサブクローンのV-J-D-Cの塩基配列を検索することでTILの抗原特異性を検討した。悪性グリオーマ12症例より抽出、合成したcDNAをVDJC領域のPCR増幅を行い、酸素処理後、Bluescriptvector、TG1,XL1-bluをcompetentcellとしてtransformationを施行した。得られたコロニーからアルカリ法によりplasmidを抽出、dideoxy法によりシークエンスを行った。Vβ13.1+TILのNDβ領域で、YRLPWGTSDSの共通配列が見られた。PBL由来Vβ13.1+T細胞に於けるTCRではTILで認められた共通配列を示す例は少なかった。Vβ3,Vβ5.1ではJC領域のみに共通配列があるもTILのVβ13.1のJC領域とも異なっていた。以上の所見よりグリオーマ特異的T細胞であることが強く示唆された。異なる悪性グリオーマ患者間に、共通塩基構造を有するT細胞が存在することは、腫瘍内におけるTILのclonalityが明かになるとともにグリオーマ特異抗原の存在が考えられる。特異抗原に対するキラーT細胞を誘導するか、もしくはこの共通塩基部のcDNA各グリオーマ患者の非刺激Tリンパ球に遺伝子導入して自己腫瘍細胞に特異的キラー活性を誘導することで、悪性グリオーマに対する特異的免疫遺伝子治療が可能となると思われる。

Research Products

• [Publications] Ebato M, Nitta T: "Skewed distribution of TCR V 7-bearing T cells within tumor-infiltrating lymphocytes of HLA-A24(9) positive..." Immunol Lett. 39. 53-64 (1994)
• [Publications] Hishii M, Nitta T: "Targeting therapy for glioma by LAK cells coupled with bispecific..." J Clin Neurosci. 1. 261-265 (1994)
• [Publications] Nitta T: "Association of Malignant Glioma with the Human Leukocyte Antigen..." Neurosurg Rev. 17. 211-216 (1994)
• [Publications] Nitta T: "Selective expression of interleuki-10 gene within glioblastoma..." Brain Res. 649. 122-128 (1994)
• [Publications] Ebato M, Nitta T: "Shared amino acid seqences in the ND βN and Nα regions of the..." Eur J Immunol. 24. 2987-2992 (1994)
• [Publications] Nitta T: "A primary perpheral/post-thymic T-cell lymphoma in the central..." J Neurosurg. 82. 77-82 (1995)
• [Publications] 新田泰三: "脳神経外科レビュー1" 三輪書店, 10 (1994)
• [Publications] 新田泰三: "癌治療とBiomodulation" 医歯薬ジャーナル, 5 (1995)