1995 Fiscal Year Annual Research Report
酵母分泌変異株におけるリボソーム蛋白質遺伝子群の転写抑制の機構解析
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06808072
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| Research Institution | HIROSHIMA UNIVERSITY |
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Principal Investigator |
水田 啓子 広島大学, 原爆放射能医学研究所, 助手 (40166012)
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| Keywords | リボソーム蛋白質遺伝子 / 酵母温度感受性変異株 / 分泌変異 / 転写調節 |
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| Research Abstract |
(1)リボソーム蛋白質遺伝子CYH2のプロモーター領域の、Rap1p転写調節因子結合部位以外のいずれの領域を欠失させても分泌経路遮断時の転写抑制がおこることから、この転写抑制はRap1pを介していると考えられた。しかし、ゲルシフトアッセイの結果Rap1pの結合には変化が認められず、Rap1pの修飾あるいは未知の調節因子のRap1pへの結合によって転写が抑制されると推定された。
(2)リボソーム蛋白質遺伝子群だけでなく解糖系遺伝子群もRap1pによる転写調節を受けているが、分泌経路遮断時にリボソーム蛋白質遺伝子群のみ特異的に転写抑制される。解糖系遺伝子群の転写を特異的に調節している因子Gcrlpに着目し、CYH2と解糖系遺伝子RGKのそれぞれのプロモーターの一部を組み合わせたキメラプロモーターを構築し、酵母温度感受性分泌変異株における制限温度での転写抑制を調べたところ、Rap1p結合部位の近傍にGcr1p結合部位が存在すると転写抑制が著しく抑えられることがわかった。しかしGcr1p単独では許容温度における転写活性そのものが非常に低いので、制限温度においてGcr1pがRap1pのかわりに転写活性を担っているのではなく、Rap1pの修飾あるいは他の蛋白質の結合からGcr1pがRap1pを保護している可能性が示唆された。
(3)酵母温度感受性分泌変異株から、制限温度においてもリボソーム蛋白質遺伝子の転写が抑制されない二重変異株をスクリーニングするために、リボソーム蛋白質遺伝子CYH2のプロモーターと半減期の短いβ-galactosidaseを産生する変異lacZ遺伝子との融合遺伝子を構築した。現在スクリーニング中である。
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Research Products
(1 results)
