1996 Fiscal Year Annual Research Report
胚幹細胞(ES細胞)などを使った造血系幹細胞の増殖と分化調節機構の研究
Project/Area Number |
06808074
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Research Institution | Tokai University |
Principal Investigator |
中辻 孝子 東海大学, 文明研究所・(海洋学部), 助教授 (00172346)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中辻 憲夫 国立遺伝学研究所, 遺伝実験生物保存研究センター, 教授 (80237312)
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Keywords | 胚幹細胞 / 造血系幹細胞 / AGM / 分化能 / 発生運命 |
Research Abstract |
研究分担者が維持するトランスジェニックマウス系統(ImmortoMouse、チャールズリバー)は、その不死化がん遺伝子の活性を調節でき、このマウス由来細胞は33℃およびインターフェロン添加条件で増殖促進状態となり39℃で細胞増殖は抑止され分化状態となる。 研究代表者は、このImmortoMouseの初期の胎仔(胎令7〜10日)から胚大動脈周辺内臓包葉(AGM)部位を切り出し長期培養とクローン継代により細胞株を樹立した。この不死化遺伝子導入マウスAGM部位由来細胞株はまず上皮様シートを形成し、増殖するとともに一層の細胞シート上に球形の細胞群を作り出し活発な増殖を継続する。すでに種々の血液系細胞のコロニーの出現を観察しており、赤血球細胞やマクロファージの幹細胞である骨髄系にくわえてリンパ球系のコロニーも観察した。また、γ線照射マウスへこのAGM部位由来細胞株を移植した結果、脾臓に多数のコロニー形成を観察した。これらの成果については、「マウス胚卵黄嚢血島および胚大動脈周辺内臓包葉からの細胞株樹立」と題して第49回日本細胞生物学会大会において発表した。さらに、この細胞株の増殖と分化に関してAGM部位由来細胞株の分化能を生体系を使って解析するために、C3H系統マウス胎仔、およびWニュータント系統マウス(c-kitの変異で造血幹細胞の減少と貧血をおこすマウス)胎仔などへ未分化および分化させたAGM部位由来細胞株を移植し長期にわたり血液、脾臓および骨髄サンプルのFACS解析や脾臓などの組織学的解析によってAGM部位由来細胞株の分化能と発生運命について研究を継続中であり、すでにいくつかの研究成果を発表する準備にとりかかっている。
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[Publications] 中辻孝子: "Differential and Constitutive Expression of the DRBI and DRA Gene Productu Controls the Surface HLA-DR Expression Level in Human Eosicophilic Leukae mia Cell Iive" Cell Structure and Function. 22巻・1号. (1997)
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[Publications] 中辻孝子他: "Ice・Goby (Shiro-uo),Leucopsarion Petersii,may he a useful matenial for studying Teleostean Embryogenesis" Zoological Science. 14巻・3号. (1997)
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[Publications] 中辻憲夫他: "Gene trausfection of mouse primendial germ cells in vitro and analysis of their suruival and growth contmol" Exp.Cell.Res.230巻. 76-83 (1997)
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[Publications] 中辻憲夫他: "Functional neguinement of sp130-mediated signaling for growth and sunival of mouse priniondial germ cell in vitro denivation of embnyonic germ (EG)cells" Development. 122巻. 1235-1242 (1996)
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[Publications] 中辻憲夫他: "Autonomous regulation of Proliferation and growth arrest in mouse primordial germ cells stadied by wixed and clonal culfunes" Exp.Cell.Res.222巻. 291-297 (1996)
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[Publications] 中辻憲夫他: "A combination of buthalo rat liver cell conditioned medium fonskolin and in embrave-bound stem cell facter stimulates rapid pnolifenation of mouse primondial gorm cellsin vitro" Devel.Growth Differ.38巻. 315-322 (1996)