サイトカイニン高感受性突然変異体の分離による菌条(シュート)文化機構の研究

1994 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 06854048
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 柿本 辰男 大阪大学, 理学部, 助手 (70214260)
• Keywords: サイトカイニン / シュート / 分化 / 菌条 / エンハンサー / タギング

Research Abstract

植物のカルスにサイトカイニンを作用されると、カルス増殖、緑化、シュート誘導が引き起こされる。サイトカイニンによるシュート誘導の分子機構を調べることが本研究の目的である。
エンハンサーを用いたタギングにより過剰発現すればシュートを誘導する遺伝子のクローニングをおこなった。シロイヌナズナのカルス50,000個のゲノムDNAにCaMV35Sエンハンサーを導入し、サイトカイニン非存在化でもシュートを再生する変異体を得た。その1系統よりDNAを抽出して導入されたエンハンサー周辺の植物DNAをクローニングした。このDNA断片はエンハンサーとともに植物に導入すればサイトカイニン非存在下でもシュートを誘導する。このことよりこのDNA断片にはサイトカイニン合成あるいはサイトカイニン受容からシュート誘導にいたる情報伝達系の遺伝子を含んでいると考えられる。このDNA断片の全塩基配列を決定した。今後これに対応するcDNAのクローニングを行なう。
また、サイトカイニン情報伝達の研究に役立つと考えられるサイトカイニン高感受性突然変異体を7系統得た。現在これら突然変異体をもちいた生理学的実験と変異遺伝子座の染色体マッピングを行なっている。