1994 Fiscal Year Annual Research Report
減数分裂における染色体分配に関与する蛋白質の機能と解析
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06858079
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Research Institution | National Institute of Radiological Sciences |
Principal Investigator |
斉藤 俊行 放射線医学総合研究所, 遺伝研究部, 主任研究官 (90205667)
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Keywords | 動原体 / 減数分裂 / 染色体分配 |
Research Abstract |
これまで同定されていた動原体蛋白質とは明らかに異なる分子量(約12万ダルトン)を持つ動原体蛋白質について、その構造を明らかにするために、蛋白質の精製・抗体の作成・ヒト精巣の発現型cDNAライブラリーのスクリーニングをおこなってきた。独立に作成された2種類のヒトcDNAライブラリーを、徹底的にスクリーニングした結果、得られた最長cDNAクローンの大きさは約2.2kbであった。塩基配列を決定したところ、このクローンはmRNAのポリ(A)配列を含む3′側から由来することが判明した。RNAブロットハイブリダイゼーションから推定されるmRNAサイズは3.6kbであるため、5′側の約1.4kbがまだ未回収と考えられた。上記の最長クローンも含めてcDNAライブラリーのスクリーニングから得られたクローンの多くは、コーディング鎖側のグアニン残基に富む領域でcDNAの伸長が停止しており、この領域を越えるものは見いだせなかった。したがって、mRNAのこの領域には、逆転写酵素の伸長合成を阻むような2次構造が存在するものと考えている。今後、耐熱性DNAポリメラーゼのいくつかに見いだされている逆転写活性を利用して、この領域よりも5′側のcDNAをクローン化し、問題の蛋白質の全構造を明らかにする予定である。
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[Publications] SAITO,T.,Seki,N.et al: "Idenfification of the human ERK Gene asa Patative Receptcr Tyrosthe Kinase and Its Chrcmcsomal Localization to 1p36.1" Genomics. (in press). (1995)
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[Publications] Seki,N.,SAITO,T.et al: "Mapping of the Human Centromere Protein B Gene(CENPB)to Chromisome 20p13 by Florescent in Sita Hybridization" Genomics. 24. 187-188 (1994)