孵卵行動発現の分子生物学的解明と遺伝子操作による発現の阻止

1995 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07044190
• Research Institution: Nagoya University
• Principal Investigator: 島田 清司 名古屋大学, 農学部, 教授 (40065579)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): PROUDMAN Jo 米国農務省, 畜産学, 研究員 ; ZADWORNY Da マギル大学, 農学部, 助教授 ; SHARP Peter ロスリン研究所, 発生・生殖部門, 教授 ; 大久保 武 三重大学, 遺伝子実験施設, 助手 (70233070) ; 齊藤 昇 名古屋大学, 農学部, 助手 (40211924) ; 河本 馨 東京大学, 農学部, 教授 (30011894)
• Keywords: PRLmRNA / GHmRNA / VIP / GRF / cyclic AMP / PRL-Rc / recombinant PRL

Research Abstract

国内各地の特産在来鶏や欧米で大量に食されるシチメンチョウにおいては、白色レグホン種などと異なり、従来の品種改良法が有効ではなく、就巣(孵卵・育雛)行動発現のために産卵能力の低下、肉生産の低下が大きな経済的問題となっている。従って本研究は、就巣発現の根底にある基本生理現象の分子生物学的解明とその知見に基づいて就巣発現を根絶するために遺伝子操作技術の確率を目的とした。
シチメンチョウ及びギフジドリの繁殖周期における下垂体PRL、LHβ及びGHのmRNA量の変化を明らかにした。両鳥種ともPRLmRNA量は産卵前期、産卵期では低かったが、就巣時に著しく増加し、育雛期に入ると急に減少した。LHβmRNA量はこれとはレシプロカルな変動を示したが、GHmRNA量は全期間を通じて小さい変動を示した。還流条件下の下垂体が、視床下部因子GRFとVIPにどのように反応するか、GHとPRLmRNA量から検討した。GRFに対し、下垂体後部のみのGHmRNA量が増加し、一方、VIPに対しては下垂体前部のみのPRLmRNA量が増加した。フォースコリンを投与するといずれのmRNA量も著しく増加した。
下垂体遊離細胞を調整し、VIPとGRFに対するPRLとGHmRNA量及びサイクリックAMP量の反応を検討すると、各mRNA量は各因子に対し増加したが、cAMP量はいずれの場合も著しく増加した。従って、PRL及びGH遺伝子の転写にはC-AMPの関与が示された。
プロラクチンレセプターの脳内の発現を検討した。in situハイブリダイゼーション解析によって視床下部領域に著しく発現が認められた。
リコンビナントプロラクチンの大腸菌による生産を行ない、精製・単離し、高い生物活性と免疫活性をもつニワトリプロラクチンを大量に産生することができた。国内はもとより国外へもこの製品を支給している。

Research Products

• [Publications] Naito, K. et al.: "Association of p34cdc2 and cyclin B1 during meiotic maturation in porcine oocytes." Dev. Biol.168. 627-634 (1995)
• [Publications] Kato, M., Shimada, K., Saito, N., Noda, K. and Ohta, M.: "Expression of P450DI_<17α-hydroxylase> and P450_<aromatase> genes in isolated granulosa, theca interna, and theca externa layers…" Biol. Reprod.52. 405-410 (1995)
• [Publications] Abinawanto, Shimada, K., Yoshida, K. and Saito, N.: "Sex reversal and gene expression of steroidgenic enzymes in the chiken." Tokai Journal of Animal Production. 5(1). 75-89 (1995)
• [Publications] 幸村真吾,加藤真澄,島田清司,齊藤昇,野田賢治,関親生: "ニワトリの排卵周期における卵巣ステロイド合成酵素mRNA量の変動" 東海畜産学会報. 5(1). 90-93 (1995)
• [Publications] Kansaku, N, Shimada, K. and Saito, N.: "Regionalized gene expressin of prolactin and growth hormore in the chiken anterior pituitary gland." Gen. Comp. Endocrinol.99. 60-68 (1995)
• [Publications] Ieda, T., Saito, N.,Ono, T. and Shimada, K.: "Effects of presence of an egg and calcium deposition in the shell gland on levels of messenger ribonucleic acid of CaBP_<-28K> and…" Gen. Comp. Endocrinol.99. 145-151 (1995)
• [Publications] Sechman, A., Shimada, K., Saito, N., Ieda, T. and Ono, T.: "Triiodothyronine (T_3) enhnces the stimulatory effect of 1,25-dihydroxyvitamin D_3 on calbindin-D_<28K> mRNA expressin …" Asian-Australasian Journal of Animal Sciences. 9. 37-44 (1996)
• [Publications] Abinawanto, Shimada, K., Yoshida, K. and Saito, N.: "Effects of aromatase inhibitor on sex differentiation and levels of P450_<17a> and P450_<arom> messenger ribonucleic acid of …" Gen. Comp. Endocrinol.(1996)
• [Publications] Yoshida, K., Shimada, K. and Saito, N.: "Expression of P450_<17α-hydroxylase> and P450_<aromatase> genes in the chiken gonad before and after sexual differentiation." Gen. Comp. Endocrinol.(accepted). (1996)
• [Publications] 島田清司,齊藤昇: "日本学術振興会" 日本学術振興会, 6 (1995)
• [Publications] 島田清司: "新畜産学大辞典" 養賢堂, 8 (1995)