エイズ病態に関わる不完全ヒト免疫不全ウイルスの評価

1996 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07044212
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 生田 和良 北海道大学, 免疫科学研究所, 教授 (60127181)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 亀岡 正典 奈良県立医科大学, 助手 (60281838) ; 中屋 隆明 北海道大学, 免疫科学研究所, 助手 (80271633) ; 木村 卓郎 北海道大学, 免疫科学研究所, 助教授 (20001737) ; JONES Ian M. Natural Environment Research Council, Ins, Project Le ; LUFTIG Ronal Louisiana State University, Medicil Cente, Professor
• Keywords: HIV-1 / clade B / clade E / アポトーシス / nef / アンチセンスDNA / アクセサリー遺伝子 / ボルナ病ウイルス

Research Abstract

AIDSは、通常のウイルス感染症とは異なり、ヒト免疫不全ウイルス(HIV)の感染後、平均10年近い無症候性キャリア(AC)期を経た後に初めて発症する。従って、従来のHIV研究の中心課題であったHIVの複製機構を基盤として、その潜在機序、さらに潜在ウイルスの活性化機序を明らかにすることが発症病態を理解する上で極めて重要である。私達は今までに、1)HIVの持続感染成立には、nef遺伝子が正常でvif、vpr、またはvpu遺伝子の変異が必須であること、2)nef遺伝子産物が、免疫担当細胞への増悪因子としても働き得ること、3)感染初期において、nef遺伝子産物に対する細胞性免疫の方が、env遺伝子産物に対するよりも、ウイルス負荷の制御に効果的に機能していること、4)不完全粒子によるアポトーシス誘導が起こることを突き止めた。そこで、本研究では、AC期のHIV潜在機序、さらにその潜在状態からAIDS発症への移行過程に認められるウイルス活性化機序に関して、次の研究を行った。
1)アクセサリー遺伝子の内、vifまたvprの変異、またはvifからvprにまたがる欠失(ミスアライメント機序)が、持続感染成立に重要であることを見い出した。
2)nef遺伝子の産物(可溶性Nef)の潜伏HIVの活性化の機序として、MOLT-4細胞表面に35kDaのNefレセプターと考えられる分子を同定した。また、このNef結合に伴ない、Ash/Grb2により30kDa分子がリン酸化され、更にNF-kBが活性化されることを明らかにした。
3)有意にNef蛋白合成を抑制し得るnefアンチセンスDNAを開発した。
4)不完全(pol proteaseとnefにnonsense変異、env gp41にアミノ酸置換がみられる非感染性)HIV-1粒子が、HIV-1感染生体内でみられるようなバイスタンダー細胞のアポトーシス誘導をおこすことを見い出した。同様なプロテアーゼ変異を、米国のHIV-1感染者の末梢血中のHIV-1の中に見い出した。また、タイのHIV-1感染者由来臨床分離株の中に、同様のアポトーシス誘導能のあることを見い出した。
5)日和見感染症としてのボルナ病ウイルスの活性化を、タイHIV-1感染者を対象として行い、HIV-1 E型感染STD患者に有意に上昇していることを見い出した。

Research Products

• [Publications] Kishi,M.: "Sequence variability of Borna disease virus open reading frame II found in human peripheral blood mononuclear cells." J.Virol.70・1. 635-640 (1996)
• [Publications] Nakaya,T.: "Demonstration of Borna disease virus RNA in peripheral blood mononuclear cells derived from Japanese patients with chronic fatigue syndrome." FEBS Lett.378. 145-149 (1996)
• [Publications] Nakamura,Y.: "Demonstration of Borna disease virus RNA in peripheral blood mononuclear cells derived from domestic cats in Japan." J.Clin.Microbiol.34・1. 188-191 (1996)
• [Publications] Wada,N.: "Long-lasting immune response induced by recombinant Bacillus Calmette-Guerin (BCG) secretion system." Scand.J.Immunol.43. 202-209 (1996)
• [Publications] Arase,N.: "Mitogenic effect of HIV-infected human T cell lines on mouse B cells mediated by surface immunoglobulin." Clin.Exp.Immunol.103. 24-29 (1996)
• [Publications] Kitani,T.: "Possible correlation between Borna disease virus infection and Japanese patients with chronic fatigue syndrome." Microbiol.Immunol.40・6. 459-462 (1996)
• [Publications] Kameoka,M.: "High susceptibility of U937-derived subclones to human immunodeficiency virus type 1 infection correlates with accumulation of unintegrated circular viral DNA." Virus Genes. 12・2. 117-129 (1996)
• [Publications] Auwanit,W.: "Unusually high seroprevalence of Borna disease virus in clade E human immunodeficiency virus type 1-infected patients with sexually transmitted diseases in Thailand." Clin.Diagn.Lab.Immunol.3・5. 590-593 (1996)
• [Publications] Bahmani,M.K.: "Varted prevalence of Borna disease virus infection in Arabic,thoroughbred and their corss-bred horses in Iran." Virus Research. 45. 1-13 (1996)
• [Publications] Nakaya,T.: "Expression of Borna disease virus messages in clinical samples from patients with brain malignant tumors." Proc.Japan.Acad.72. 157-162 (1996)
• [Publications] Kameoka,M.: "Intracellular glutathione as a possible direct blocker of HIV type 1 reverse transcription." AIDS Res.Hum.Retrov.12・17. 1635-1638 (1996)
• [Publications] Kameoka,M.: "Induction of apoptosis by a protease-defective particle preparations of human immunodeficiency virus type 1 is specific to a subset of U937-derived subclones." Int.Immunol.8・11. 1687-1697 (1996)
• [Publications] Fujinaga,K.: "Growth dominance of a revertant virus generated during in vitro serial passage of nef frameshift mutant of HIV-1." Biochem.Biophys.Res.Commun.229. 96-101 (1996)
• [Publications] Nakaya,T.: "Serial passage of human immunodeficiency virus type 1,generates misalignment deletions in non-essential accessory genes." Virus Res.46. 139-147 (1996)
• [Publications] Hagiwara,K.: "Borna disease virus RNA in peripheral blood mononuclear cells obtained from healthy dairy cattle." Med.Microbiol.Immunol.185・3. 145-151 (1996)
• [Publications] 生田和良: "安全なHIVワクチンと遺伝子治療法の試み" 北海道医学誌. 71・1. 21-26 (1996)
• [Publications] 中屋隆明: "末梢血中のボルナ病ウイルスゲノムの検出-RT-PCR法による高感度RNAゲノムの検出-" 蛋白質 核酸 酵素. 41・5. 194-198 (1996)
• [Publications] 生田和良: "日本の動物および人におけるボルナ病ウイルス感染状況" 馬の科学. 33・3. 215-220 (1996)
• [Publications] 生田和良: "慢性疲労症候群とウイルス感染" 医学のあゆみ. 177・13. 899-904 (1996)
• [Publications] 生田和良: "ボルナ病ウイルスと精神疾患" 医学のあゆみ. 177・13. 905-909 (1996)
• [Publications] 生田和良: "ボルナ病ウイルス" 感染症. 26・4. 21-24 27-32 (1996)
• [Publications] 岩橋和彦: "四国地方におけるボルナ病ウイルス(BDV)感染と精神分裂病との関連に関する疫学的調査(Part 1-臨床経過の検討)" 精神科治療学. 11・10. 1075-2078 (1996)