1995 Fiscal Year Annual Research Report

糖輸送担体の哺乳動物細胞でのソーティング機構の解明

Research Project

Project/Area Number	07044226
Research Institution	Yamaguchi University
Principal Investigator	岡芳知山口大学, 医学部, 教授 (70175256)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	DAVID James クイーンスランド大学, 分子生物学遺伝子工学センター, 上級研究員犬飼浩一朝日生命成人病研究所, 主任研究員片桐秀樹東京大学, 医学部・附属病院, 医員谷澤幸生山口大学, 医学部・附属病院, 助手 (00217142)
Keywords	促通拡散輸送 / 糖輸送 / キメラ蛋白 / 細胞内ソーティング
Research Abstract	哺乳動物促通拡散ヘキソース輸送体のアイソフォームであるGLUT5はフルクトース輸送体であり、この輸送能はグルコース輸送の特異的阻害剤であるサイトカラシンBでも阻止されず、サイトカラシンBのGLUT5への結合も認められなかった。GLUT1とGLUT5間でさまざまなキメラ蛋白cDNAを作製しCHO細胞に発現させ、細胞での発現部位を免疫組織染色で確認すると共に、グルコースおよびフルクトースの輸送特性を検討し、グルコースおよびフルクトース輸送能に必要な部位の解明を試みた。これらの結果より細胞内ループ部分および膜貫通ドメイン7-12がGLUT1のグルコース輸送能にきわめて重要と考えられる一方、フルクトース輸送能については、GLUT5のC末端細胞内部位をGLUT1で置き換えただけのキメラ輸送体にさえフルクトース輸送能がなく、GLUT5のフルクトース輸送能の構造要求性は他のヘキソストランスポーターに比べて厳格であることが示された。GLUT5とGLUT1については、極性のある細胞での細胞内局在に違いがあり、細胞内ソーテイング機構についても良いモデルとなる。すなわち、GLUT5はapical側に、GLUT1はbasolateral側に局在し、消化管腔から吸収した糖を血管内に取り込むのに関わっている。そこで、細胞内ソーテイングを決定するモチーフを解明するために、GLUT5とGLUT1の間で様々なキメラを作製し、ヒト消化管上皮細胞のモデルであるCaco-2細胞に発現させ、検討している。preliminaryな結果ではあるが、膜貫通部位6と7の間にある細胞内ループ部分がCaco-2細胞におけるGLUT1とGLUT5のソーテイングの違いを決定しているとの結果を得た。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Ishihara H,et al.: "Inhibition of pancreatic β-cellglucokinase by antisense RNA expression in transgenic mice : mouse strain-dependent alteration of glucose tolerance." FEBS Letters. 371. 329-332 (1995)
[Publications] Tadokoro C,et al.: "Expresson and localization of glucose trandporter 1 (GLUT1) in the rat oviduct : a possible supplir of glucose to embryo during early embryonic development." Biochem Biophys Res Commun. 214. 1211-1218 (1995)
[Publications] Ishida K,et al.: "Regulation of glucose transporter 1 (GLUT1) gene expression by epidermal growth factor in bovine corneal endothelial cells." Japanese Journal Of Ophthalmology. 39. 225-232 (1995)
[Publications] Inukai K,et al.: "Chearacterization of rat GLUT5 and functional analysis of chimeric proteins of GLUT1 glucose transorter and GLUT5 fructose transporter." Endocrinology. 136. 4850-4857 (1995)
[Publications] Ishihara H,et al.: "Human GLUT-2 overexpression does not affect glucose-stimulated insulin secretion in MIN6 cells." Am.J.Physiol.269. 897-902 (1995)
[Publications] Katagiri H,et al.: "A novel isoform of syntaxin-binding protein homologous to yeast Secl expressed ubiquitously in mammalian cells." J Biol Chem. 270. 4963-4966 (1995)

1995 Fiscal Year Annual Research Report

糖輸送担体の哺乳動物細胞でのソーティング機構の解明

Principal Investigator

岡 芳知 山口大学, 医学部, 教授 (70175256)

Research Products

[Publications] Ishihara H,et al.: "Inhibition of pancreatic β-cellglucokinase by antisense RNA expression in transgenic mice : mouse strain-dependent alteration of glucose tolerance." FEBS Letters. 371. 329-332 (1995)

[Publications] Tadokoro C,et al.: "Expresson and localization of glucose trandporter 1 (GLUT1) in the rat oviduct : a possible supplir of glucose to embryo during early embryonic development." Biochem Biophys Res Commun. 214. 1211-1218 (1995)

[Publications] Ishida K,et al.: "Regulation of glucose transporter 1 (GLUT1) gene expression by epidermal growth factor in bovine corneal endothelial cells." Japanese Journal Of Ophthalmology. 39. 225-232 (1995)

[Publications] Inukai K,et al.: "Chearacterization of rat GLUT5 and functional analysis of chimeric proteins of GLUT1 glucose transorter and GLUT5 fructose transporter." Endocrinology. 136. 4850-4857 (1995)

[Publications] Ishihara H,et al.: "Human GLUT-2 overexpression does not affect glucose-stimulated insulin secretion in MIN6 cells." Am.J.Physiol.269. 897-902 (1995)

[Publications] Katagiri H,et al.: "A novel isoform of syntaxin-binding protein homologous to yeast Secl expressed ubiquitously in mammalian cells." J Biol Chem. 270. 4963-4966 (1995)

岡芳知山口大学, 医学部, 教授 (70175256)