1996 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
07044245
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Research Institution | Nagoya University |
Principal Investigator |
曽我部 正博 名古屋大学, 医学部, 教授 (10093428)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
SACHS Freder ニューヨーク州立大学, 医学部, 教授
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Keywords | SAチャネル / ショウジョウバエ / cGMP依存性チャネル / 遺伝子クローニング / 抗体 / クモ毒 |
Research Abstract |
SA(伸展活性化)チャネルはあらゆる細胞に分布し、重要な生理的役割を担っている。現時点での最重要課題はその分子実体の解明である。ごく最近、大腸菌のSAチャネル遺伝子がクローニングされたが、その構造はかなり特殊で、真核生物のそれとは相同性が期待できそうもない。本計画の目的は、米国のF.Sachs博士と協力して、生理学や遺伝学に適した真核生物材料からSAチャネル遺伝子を同定するとともに、SAチャネル特異的なクモ毒成分の精製を進め蛋白質レベルからの分子実体の解明を行うことによって、SAチャネルの分子生物学的研究の突破口を開くことである。本年度は以下のような成果が得られた。 (1)ショウジョウバエ遺伝子ライブラリィから機械受容に関連する可能性のある新しい型のcGMP依存性イオンチャネル遺伝子がクローニングされ、その遭伝子配列が決定された。(2)この遭伝子を培養(COS)細胞に導入し、遺伝子を発現することに成功した。(3)さらにその配列をもとに抗体を作成した。(4)クモ毒からSAチャネルをブロックする数種類の有効成分が単離精製され、一つの成分についてその全構造を決定した。 以上のように本共同研究によってSAチャネルの分子生物学と蛋白質科学を進めるための貴重なツールを得ることができ、当初の目的をほぼ達成することができた。今後これらのツールを活用してSAチャネル分子の構造機能連関、および生理機能に関する本格的研究を展開していきたい。
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[Publications] Murakami,T.,Shimomura,Y.,Fujitsuka,N.,Sokabe,M.,Okamura,K.,Sakamoto,S.: "Enlargement of glycogen store in rat liver and muscle by fructose diet intake and execise training." J.Appl.Physiol.(in press).
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[Publications] Sokabe,M.,Nunogaki,K.& Naruse,K.: "Stretch activated ion channels:Single channel vs.whole cell responses" Progr Cell Res.6. 139-149 (1996)
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[Publications] Kobuke,Y.,Tanaka,Y.,Sokabe,M.: "Artificial non-peptide single ion channels." Progr Cell Res.6. 167-188 (1996)
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[Publications] Okada,H.,Yoshida,J.,Sokabe,M.,Wakabayashi,T.,Hagiwara,M.: "Suppression of CD44 expression decreases migartion and invasion of human glioma cells." Int J Cancer Res,. 66. 255-260 (1996)
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[Publications] 曽我部正博、成瀬恵冶: "培養細胞への各種伸展刺激法" 組織培養. 22. 413-417 (1996)
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[Publications] 曽我部正博、成瀬恵治、嶽本和久: "SAチャネルは細胞の機械センサか?" 蛋白質・核酸・酵素. 41. 2-13 (1996)
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[Publications] 曽我部正博: "単一チャネルデータの処理と解析法 In パッチクランプ実験技術法(岡田編)pp50-62" 吉岡書店, 181 (1996)
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[Publications] 成瀬恵治、曽我部正博: "血管活性化-張力(tension) In 細胞工学別冊「動脈硬化+高脂血症研究ストラテジー」(山田、佐藤監修)pp90-94" 秀潤社, 455 (1996)
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[Publications] 曽我部正博: "パッチクランプ法による単一チャネル電流の記録 In 英語論文セミナー、現代の細胞生物学(馬淵、山本編)pp113-120" 講談社, 168 (1996)
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[Publications] 曽我部正博: "イオンチャネルのゲートとゆらぎ In 生物物理別冊 生体膜(葛西、田口編)pp47-66" 吉岡書店, 167 (1996)
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[Publications] 曽我部正博: "細胞機能 In アトラスで学ぶ生理学 (高田編)pp2-13" 丸善, 281 (1996)
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[Publications] 伊藤文雄、曽我部正博 他: "クローズアップ 生理学 pp1-243" 名古屋大学出版会, 243 (1996)