1995 Fiscal Year Annual Research Report

中枢神経系における内向き整流K^+チャネルの分子機能解析-

Research Project

Project/Area Number	07044262
Research Institution	Osaka University
Principal Investigator	倉智嘉久大阪大学, 医学部, 教授 (30142011)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	山田充彦大阪大学, 医学部, 助手内匠透大阪大学, 医学部, 助手 (00222092) 堀尾嘉幸大阪大学, 医学部, 講師 (30181530) CHELLA S Dav メーヨークリニック, 教授
Keywords	カリウムチャネル / 中枢神経系 / 分子生物学
Research Abstract	1.内向き整流カリウム(K_<rec>)チャネルのクローンIRK3の遺伝子をクローニングし、その相同組み替えを有するES細胞を作製した。現在IRK3ノックアウトマウスを作成中である。2.G蛋白質調節K_<rec>チャネルのクローンGIRK1の遺伝子のクローニングにも成功しつつある。さらに、GIRK1のG蛋白質βγ結合部位C末端が欠落するスプライシングバリアントが存在することが明かになった。このクローンをアフリカツメガエルの卵母細胞に発現させその機能を検討中であるが、まだ結論を得ていない。3.G蛋白質調節K_<rec>チャネルのもう一種のクローンGIRK2のスプライシングバリアントGIRK2Bを新たにクローニングし、このクローンがGIRK1とheteromultimerを形成してG蛋白質調節K_<rec>チャネルを形成することを明かにした。4.K_<rec>チャネルクローンK_<AB-2>の遺伝子クローニングも現在遂行中である。5.マウス脳内でのK_<rec>チャネルクローンIRK1,2,3,ラット脳内でのK_<AB-2>の発現分布のin situハイブリダイゼーション法による検討の結果、IRK1はほぼマウス脳内全体に、IRK2は特に小脳顆粒細胞層に、IRK3は特に前脳に強く発現しており、K_<AB-2>はグリア細胞特異的に発現し、網膜ミューラー細胞でも発現していることが解かった。6.GIRK1および2に対する抗体を作製しこれを用いて、GIRK1はほぼ例外無くGIRK2とheterromerを形成しpresynapse領域に、GIRK2は単独または他の蛋白質とheterromerを形成してpostsynapse領域に発現している可能性を示唆する結果を得た。

Research Products
(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Yamada M: "Spermine gates in ward-rectifying muscarinic but not ATP-sensitive K+channels in rabbit atrial myocytes : intracellular substance-mediated mechanism of in ward rectification." The Journal of Biological Chemistr. 270. 9289-9294 (1995)
[Publications] Takumi T: "A novel ATP-dependent inward rectifier potassium channel is expressing predominantly in glial cells." The Journal of Biological Chemistry. 270. 16339-16346 (1995)
[Publications] Inanobe A: "Gbg directly binds to the carboxyl terminus of the G protein-gated muscarinic K+channel,GIRK1." Biochemical and Biophysical Research Communications. 212. 1022-1028 (1995)
[Publications] Inanobe A: "Immunological and physical characterization of the brain G protein-gated muscarinic potassium channel." Biochemical and Biophysical Research Communications. 26. 1238-1244 (1995)
[Publications] Isomoto S: "A novel ubiquitously-distributed isoform of GIRK2 (GIRK2B) enhances GIRK1-expression of the G-protein-gated K+current in Xenopusoocytes." Biochemical and Biophysical Research Communications. 218. 286-291 (1995)
[Publications] Horio Y: "Differential distribution of classical inwardly rectifying potassium channel mRNAs in the brain ; comparison of IRK2 with IRK1 and IRK3." FEBS Letters. 379. 239-243 (1996)

1995 Fiscal Year Annual Research Report

中枢神経系における内向き整流K^+チャネルの分子機能解析-

Principal Investigator

倉智 嘉久 大阪大学, 医学部, 教授 (30142011)

Research Products

[Publications] Yamada M: "Spermine gates in ward-rectifying muscarinic but not ATP-sensitive K+channels in rabbit atrial myocytes : intracellular substance-mediated mechanism of in ward rectification." The Journal of Biological Chemistr. 270. 9289-9294 (1995)

[Publications] Takumi T: "A novel ATP-dependent inward rectifier potassium channel is expressing predominantly in glial cells." The Journal of Biological Chemistry. 270. 16339-16346 (1995)

[Publications] Inanobe A: "Gbg directly binds to the carboxyl terminus of the G protein-gated muscarinic K+channel,GIRK1." Biochemical and Biophysical Research Communications. 212. 1022-1028 (1995)

[Publications] Inanobe A: "Immunological and physical characterization of the brain G protein-gated muscarinic potassium channel." Biochemical and Biophysical Research Communications. 26. 1238-1244 (1995)

[Publications] Isomoto S: "A novel ubiquitously-distributed isoform of GIRK2 (GIRK2B) enhances GIRK1-expression of the G-protein-gated K+current in Xenopusoocytes." Biochemical and Biophysical Research Communications. 218. 286-291 (1995)

[Publications] Horio Y: "Differential distribution of classical inwardly rectifying potassium channel mRNAs in the brain ; comparison of IRK2 with IRK1 and IRK3." FEBS Letters. 379. 239-243 (1996)

倉智嘉久大阪大学, 医学部, 教授 (30142011)