1997 Fiscal Year Annual Research Report

ステロイド合成P450遺伝子転写調節制御機構

Research Project

Project/Area Number	07044277
Research Institution	KYUSHU UNIVERSITY
Principal Investigator	名和田新九州大学, 医学部, 教授 (10038820)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	諸橋憲一郎岡崎国立共同研究機構, 基礎生物学研究所, 教授 (30183114) 生山祥一郎九州大学, 医学部, 助手 (20184393) 柳瀬敏彦九州大学, 医学部, 助手 (30239818) 高柳涼一九州大学, 医学部, 講師 (30154917) WATERMAN Mic バンダービルト大学, 医学部, 教授
Keywords	ステロイド / 転写因子 / 性分化 / P450 / Ad4BP / SF-1 / DAX-1 / 先天性副腎低形成
Research Abstract	1.Ad4BP(SF-1),DAX-1遺伝子の先天性副腎低形成症例における解析と下垂体腫瘍での発現の検討:性腺、副腎の発生に必須の転写因子Ad4BP(SF-1)、DAX-1のヒト遺伝子構造の決定により、性分化異常を伴う先天性副腎低形成症例でのこれらの遺伝子の解析が可能となった。症例の末梢血リンパ球よりゲノムを抽出、PCRで増幅し、塩基配列を決定した結果、解析した男性6例はすべてDAX-1遺伝子の異常であり1例のアミノ酸置換、5例はstopないしframe shiftに伴うstop codonを認めた。タイ人女性3例にはAd4BP遺伝子の異常は認められなかった。副腎および性腺を欠損、表現型が女性の死産例(46XY)では、本来Ad4BPが発現している脾臓に発現を認めなかった(抗体染色)が、一部のexonのみしか増幅できず、さらに検討中である。以上の結果は同じ表現型を示す性分化異常症の原因にAd4BP(SF-1),DAX-1以外のものが存在することを証明するものと結論される。種々の下垂体腫瘍でのAd4BPの発現をRT-PCRで検討すると、非機能性腫瘍でLH,FSHを検出できるものにAd4BPが発現していることが判明、多くの非機能性下垂体腫瘍の起源がLHFSH前分化段階の細胞であることが明らかとなった。 2.Ad4BP(SF-1)とDAX-1のステロイドP450遺伝子に対する作用:Ad4BPは主要なステロイド産生P450遺伝子、P450scc,P45011b,P45017aのすべての転写を促進した。一方、DAX-1はこれらの遺伝子の転写を抑制、両者はP450遺伝子の転写に関して拮抗する関係にあることが判明した。DAX-1遺伝子の5'上流にはAd4BP結合配列が存在することを見い出し、DAX-1遺伝子の転写がAd4BPによりtransactivationされることが判明した。このように、Ad4BP(SF-1)とDAX-1は互いに密接に相互作用し、下流の遺伝子の転写調節を行うことが推定された。 3.Ad4BP遺伝子上流のE boxに結合する因子の検討:E box結合因子はbHLH構造を有する蛋白質ファミリーを形成する。これらサブファミリー内で高度に保存されるbHLH領域にDNAプライマーを設定し、新生児ラット精巣cDNAを鋳型としてPCR法を用いて単離を試みた。組織非特異的発現を示すE box結合因子の完全長cDNAの単離に成功した。

Research Products

(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] Ogo A., Waterman M.R., Kagawa N.: "cAMP-dependent transactivation involving the homeodomain protein Pbxl" Archives of Biochemistry and Biophysics. 338. 193-200 (1997)
[Publications] Ogo A., Waterman M.R., McAllster J.M.et al.: "The homeodomain protein Pbxl is involved in cAMP-dependent transcription of human CYP17^1" Archives of Biochemistry and Biophysics. 348. 226-231 (1997)
[Publications] Leers-Sucheta S., Morohashi K.et al.: "Synergistic activation of the human typell 3β-hydroxysteroid dehydrogenase/D5D4 isomerase promoter by the transcription factor steroidogenic factor-1/adrenal 4-binding proterin andphorbol ester" J.Biol.Chem.272. 7960-7967 (1997)
[Publications] Lund J., Bakke M., Mellgren G.et al.: "Transcriptional regulation of the bovine CYP17 gene by cAMP" Steroid. 62. 43-45 (1997)
[Publications] Mason J.I., Keeney D., Bird I.M.et al.: "The regulation of 3b-hydroxysteroid dehydrogenase expression" Steroid. 62. 164-168 (1997)
[Publications] Morohashi K.: "The ontogenesis of the steroidogenic tissues" Genes to Cells. 2. 95-106 (1997)
[Publications] Kakiki M, Morohashi K, Nomura M et al.: "Expression of aldosterone synthase cytochrome P450(P450aldo)mRNA in ratadrenal glomerulosa cells by angiotensin II typel teceptor" Endocr Res. 23(4). 277-295 (1997)
[Publications] Inoue H.Nomura M, Yanase T et al: "A rare case of 46,XX true hermaphroditism with hidden mosaicism with SRY-bearing cells in the gonads" Internal Medicine. (in press). (1998)

1997 Fiscal Year Annual Research Report

ステロイド合成P450遺伝子転写調節制御機構

Principal Investigator

名和田 新 九州大学, 医学部, 教授 (10038820)

Research Products

[Publications] Ogo A., Waterman M.R., Kagawa N.: "cAMP-dependent transactivation involving the homeodomain protein Pbxl" Archives of Biochemistry and Biophysics. 338. 193-200 (1997)

[Publications] Ogo A., Waterman M.R., McAllster J.M.et al.: "The homeodomain protein Pbxl is involved in cAMP-dependent transcription of human CYP17^1" Archives of Biochemistry and Biophysics. 348. 226-231 (1997)

[Publications] Leers-Sucheta S., Morohashi K.et al.: "Synergistic activation of the human typell 3β-hydroxysteroid dehydrogenase/D5D4 isomerase promoter by the transcription factor steroidogenic factor-1/adrenal 4-binding proterin andphorbol ester" J.Biol.Chem.272. 7960-7967 (1997)

[Publications] Lund J., Bakke M., Mellgren G.et al.: "Transcriptional regulation of the bovine CYP17 gene by cAMP" Steroid. 62. 43-45 (1997)

[Publications] Mason J.I., Keeney D., Bird I.M.et al.: "The regulation of 3b-hydroxysteroid dehydrogenase expression" Steroid. 62. 164-168 (1997)

[Publications] Morohashi K.: "The ontogenesis of the steroidogenic tissues" Genes to Cells. 2. 95-106 (1997)

[Publications] Kakiki M, Morohashi K, Nomura M et al.: "Expression of aldosterone synthase cytochrome P450(P450aldo)mRNA in ratadrenal glomerulosa cells by angiotensin II typel teceptor" Endocr Res. 23(4). 277-295 (1997)

[Publications] Inoue H.Nomura M, Yanase T et al: "A rare case of 46,XX true hermaphroditism with hidden mosaicism with SRY-bearing cells in the gonads" Internal Medicine. (in press). (1998)

名和田新九州大学, 医学部, 教授 (10038820)