1995 Fiscal Year Annual Research Report

ヒトのミトコンドリアrRNAおよびtRNA遺伝子の進化機構RNA機能構造

Research Project

Project/Area Number	07250211
Research Institution	Nagoya University
Principal Investigator	田中雅嗣名古屋大学, 医学部, 助教授 (60155166)
Keywords	ミトコンドリア遺伝子 / リボゾームRNA / 変異発生頻度 / 塩基配列 / 分子進化
Research Abstract	【目的】ヒトのミトコンドリア遺伝子(mtDNA)は、1)組み換えなどの複雑な修復を受けず進化機構が単純である、2)コピー数が大きいため遺伝子増幅が容易でPCR産物の塩基配列を直接決定できる、3)種内変異の頻度が高く大量のデータを集積できる、などの特徴があるため、mtDNAは分子進化研究のモデル系として貴重である。本研究ではヒトの12SrRNA遺伝子の種内変異を解析し、rRNA分子進化の特徴を明らかにすることを目指した。【mRNAをコードする領域における変異】43個のヒトのmtDNAの全塩基配列(16,569bp×43=712,467bp)を決定し、mtDNAによってコードされた13種のサブユニット遺伝子の第3コドン位置(特にfour-fold degenerate sites)の塩基置換の頻度を実測した。その結果、L鎖(light strand)H鎖(heavy strand)との間で、変異発生頻度が著しく異なることを見いだした。すなわち、L鎖上のG→A塩基転位はH鎖上の9倍の頻度(G_L→A_L 20/97sites,20.6%対G_H→A_H 18/821sites、3.2%)で生じ、L鎖上のT→C塩基転移はH鎖上の1.8倍の頻度で生じていた。すなわち4種の塩基は鎖に関して非対称的な変異圧を受けていた。さらに、変異発生頻度の逆数から第3コドン位置の塩基組成を予測すると、実測値とよく一致した[A=35.0%(予測値)対39.5%(実測値),C=40.2%対42.0%,G=6.2%対5.0%,T=18.7%対13.5%]。このようにmtDNAの二本の鎖の間の塩基組成の偏りが変異の発生頻度の差に基づくことが明らかになった。【12SrRNA領域における変異】ヒトの49例の日本人個体の12SrRNA遺伝子(954塩基)において合計22カ所に変異が観察された。ステム部分の9カ所の変異のうち、U:A__-→U:G__-が3カ所、G__-:U→A__-:Uが2カ所、G:C__-→G:U__-が1カ所に観察された。合計6カ所の変異にG:U塩基対が関与していた。また非Watoson-Crick塩基対が関与する、A__-:U→C__-:U、U__-:A→C__-:A、U:U__-→U:C__-がそれぞれ1カ所に観察された。ループ部分の13カ所の変異のうち、1カ所のC→A transversionを除いた12カ所はtransitionであった。G→Aが2カ所(2/58=3.4%)に対してA→Gが3カ所(3/197=1.5%)、U→Cが4カ所(4/69=5.8%)に対してC→Uが3カ所(3/144=2.1%)に観察され、変異頻度の高い塩基は存在比が低い傾向が観察された。【結論】12SrRNA遺伝子のヒト種内変異の解析から、ステム部分でのA:U【double arrow】G:U【double arrow】G:C間の遷移においてG:U塩基対が中間体としての役割を果たしていること、ループ部分の塩基組成に変異発生頻度が反映していることが示唆された。

Research Products

(17 results)

All Other

All Publications (17 results)

[Publications] Yoneda M,et al.: "Oxygen stress indeces an apoptotic cell death associated with fragmentation of mitochondrial" Biochem.Biophys.Res.Commun.209. 723-729 (1995)
[Publications] Tanaka M,et al.: "Mitochondrial DNA mutations in cardiomyopathy : Combination of replacements yielding cysteine residues and tRNA mutations" Muscle Nerve. Suppl 3. S165-S169 (1995)
[Publications] Shimizu Y,et al.: "Elevated mitochondrial gene expression during rat liver regeneration after portal vein ligation" Hepatology. 22. 1222-1229 (1995)
[Publications] Ozawa T,et al.: "Mitochondrial DNA mutations and survival rate" Lancet. 345. 189 (1995)
[Publications] Ozawa T,et al.: "Genotype and phenotype of severe mitochondrial cardiomyopathy : a recipient of heart transplantation and the genetic control" Biochem.Biophys.Res.Commun.207. 613-620 (1995)
[Publications] Mizuno Y,et al.: "Role of mitochondria in the etiology and pathogenesis of Parkinson's disease" Biochim Biophys Acta. 1271. 265-274 (1995)
[Publications] Kurauchi O,et al.: "The study of mitochondrial gene modifications in human placenta" Placenta. 16. 461-467 (1995)
[Publications] Yoneda M,et al.: "Oxygen stress indeces an apoptotic cell death asociated with fragmentation of mitochondrial" Biochem.Biophys.Res.Commun.209. 723-729 (1995)
[Publications] Kishimoto M,et al.: "Mitochondrial mutation in diabetic patient with gastointestinal symptoms" Lancet. 345. 452 (1995)
[Publications] Ikebe S,et al.: "Point mutations of mitochondrial genome in Parkinson's disease" Mol.Brain Res.28. 281-295 (1995)
[Publications] Hayakawa M,et al.: "Mitochondrial DNA minicircles,lacking replication origins,exist in the cardiac muscle of a young normal subject" Biochem.Biophys.Res.Commun.215. 952-960 (1995)
[Publications] Hattori N,et al.: "Structural organization and chromosomal localization of the human nuclear gene (NDUFV2) for the 24-kDa iron-sulfur subunit of Complex I in mitochondrial respiratory chain" Biochem.Biophys.Res.Commun.216. 723-729 (1995)
[Publications] Sawano T,et al.: "Mitochondrial DNA mutations associated with the 11778 mutation in Leber's disease" Biochem.Mol.Biol.Int.(in press). (1996)
[Publications] Onoue S,et al.: "Increase of mtDNA-binding proteins and mitochondrial mRNAs in regenerating liver" J.Surg.Res.(in press). (1996)
[Publications] Nakamura N,et al.: "Specific detection of deleted mitochondrial DNA by in situ hybridization using a fused gene probe" Biophys Biochem Acta. (in press). (1996)
[Publications] Yoritaka N,et al.: "Increased HNE-modified proteins in nigral neurons of Parkinson's disease" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. (in press). (1996)
[Publications] Tanaka M,et al.: "Automated sequencing of mitochondrial DNA" Academic Press.Orlando,FL., 723-729 (1995)

1995 Fiscal Year Annual Research Report

ヒトのミトコンドリアrRNAおよびtRNA遺伝子の進化機構RNA機能構造

Principal Investigator

田中 雅嗣 名古屋大学, 医学部, 助教授 (60155166)

Research Products

[Publications] Yoneda M,et al.: "Oxygen stress indeces an apoptotic cell death associated with fragmentation of mitochondrial" Biochem.Biophys.Res.Commun.209. 723-729 (1995)

[Publications] Tanaka M,et al.: "Mitochondrial DNA mutations in cardiomyopathy : Combination of replacements yielding cysteine residues and tRNA mutations" Muscle Nerve. Suppl 3. S165-S169 (1995)

[Publications] Shimizu Y,et al.: "Elevated mitochondrial gene expression during rat liver regeneration after portal vein ligation" Hepatology. 22. 1222-1229 (1995)

[Publications] Ozawa T,et al.: "Mitochondrial DNA mutations and survival rate" Lancet. 345. 189 (1995)

[Publications] Ozawa T,et al.: "Genotype and phenotype of severe mitochondrial cardiomyopathy : a recipient of heart transplantation and the genetic control" Biochem.Biophys.Res.Commun.207. 613-620 (1995)

[Publications] Mizuno Y,et al.: "Role of mitochondria in the etiology and pathogenesis of Parkinson's disease" Biochim Biophys Acta. 1271. 265-274 (1995)

[Publications] Kurauchi O,et al.: "The study of mitochondrial gene modifications in human placenta" Placenta. 16. 461-467 (1995)

[Publications] Yoneda M,et al.: "Oxygen stress indeces an apoptotic cell death asociated with fragmentation of mitochondrial" Biochem.Biophys.Res.Commun.209. 723-729 (1995)

[Publications] Kishimoto M,et al.: "Mitochondrial mutation in diabetic patient with gastointestinal symptoms" Lancet. 345. 452 (1995)

[Publications] Ikebe S,et al.: "Point mutations of mitochondrial genome in Parkinson's disease" Mol.Brain Res.28. 281-295 (1995)

[Publications] Hayakawa M,et al.: "Mitochondrial DNA minicircles,lacking replication origins,exist in the cardiac muscle of a young normal subject" Biochem.Biophys.Res.Commun.215. 952-960 (1995)

[Publications] Hattori N,et al.: "Structural organization and chromosomal localization of the human nuclear gene (NDUFV2) for the 24-kDa iron-sulfur subunit of Complex I in mitochondrial respiratory chain" Biochem.Biophys.Res.Commun.216. 723-729 (1995)

[Publications] Sawano T,et al.: "Mitochondrial DNA mutations associated with the 11778 mutation in Leber's disease" Biochem.Mol.Biol.Int.(in press). (1996)

[Publications] Onoue S,et al.: "Increase of mtDNA-binding proteins and mitochondrial mRNAs in regenerating liver" J.Surg.Res.(in press). (1996)

[Publications] Nakamura N,et al.: "Specific detection of deleted mitochondrial DNA by in situ hybridization using a fused gene probe" Biophys Biochem Acta. (in press). (1996)

[Publications] Yoritaka N,et al.: "Increased HNE-modified proteins in nigral neurons of Parkinson's disease" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. (in press). (1996)

[Publications] Tanaka M,et al.: "Automated sequencing of mitochondrial DNA" Academic Press.Orlando,FL., 723-729 (1995)

田中雅嗣名古屋大学, 医学部, 助教授 (60155166)