1995 Fiscal Year Annual Research Report
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07260201
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
宮崎 純一 東北大学, 加齢医学研究所, 教授 (10200156)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
生田 宏一 東京大学, 医学部, 客員助教授 (90193177)
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| Keywords | ノックアウトマウス / ジーンターゲッティング / ES細胞 |
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| Research Abstract |
マウス胚幹(ES)細胞にジーンターゲッティング技術を応用することにより、ある1つの遺伝子を不活化させるだけでなく、複数の遺伝子を含む領域の欠失を引き起こすことも可能になると考えられる。本研究では通常のジーンターゲッチィング法および、cre-loxPシステムを用いて、ジーンターゲッティングの技術を特定の染色体領域の欠失へ応用することを目標としている。通常のジーンターゲッティング法ではすでにいくつかの遺伝子(C3G,PAFR,IL-5R,IL-7Rなど)に関してES細胞でのジーンターゲッティングおよびノックアウトマウス作製に成功しており、各々のノックアクトマウスの解析を進めている。loxPで挟まれた配列をES細胞に取り込ませ、creを一過性に発現させると、その配列が効率よく除かれること、loxPで挟まされた配列をもつトランスジェニックマウスの受精卵にマイクロインジェクションでcreを一過性発現させると、効率よくその配列が除去されることが示された。ES細胞におけるcreの効率的な発現のために、アデノウイルスベクターにcreの発現ユニットを組み込んだものを作製した。loxPで挟まれた領域の欠失が効率的に除去されることが示された。さらにneo遺伝子以外の選択マーカー遺伝子としてbsrが利用できるように系の開発を進めている。
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[Publications] Araki,K. et al.: "Slite-specific recombination of a transgene in fertilized eggs by transient expression of Cre recombinase." Proc.Natl.Acad.Sci.USA.92. 160-164 (1995)
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[Publications] Katagiri,H.et al.: "A novel isoform of syntaxin-binding protein homologous to yeast Secl expressed ubiquitously in mammalian cells." J.Biol.Chem.270. 4963-4966 (1995)
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[Publications] Hagiwara,S.et al.: "An inhibitory role for phosphatidylinositol 3-kinase in insulin secretion from pancreatic b cell line MlN6." Biochem.Biophys.Res.Commun.214. 51-59 (1995)
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[Publications] Sakai,K.et al.: "Efficient regulation of gene expression by adenovirus-mediated delivery of the Cre recombinase." Biochem.Biophys.Res.Commun.217. 393-401 (1995)
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[Publications] Ohgawara,H.et al.: "Assessment of pore size of a semipermiable membrane for immunoisolation on xenoimplantation of pancreatic B cells using a diffusion chamber." Transpl.Proc.27. 3319-3320 (1995)
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[Publications] Yagi,N.et al.: "Expression of intracellular adhesion molecule-1 on pancreatic b-cells accelerates b-cell destruction by cytotoxic T-cells in murine autoimmune diabetes." Diabetes. 44. 744-752 (1995)
