ニューロン死と防御に関する細胞分子生物学的研究

1995 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07264201
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 野村 靖幸 北海道大学, 薬学部, 教授 (00034041)
• Keywords: 細胞死 / アポトーシス / Bcl-2 / MPP^+ / パーキンソン病 / SH-SY5Y細胞 / プロテインキナーゼC / プロテインキナーゼA

Research Abstract

パーキンソン病(PD)は静止時振戦、無動症および筋固縮を主症状とする神経変性疾患であり、アルツハイマー病とともに重篤な老人性の脳疾患である。PD発症には、脳の黒質線条体系のドパミン(DA)含有神経細胞の変性とそれに伴うDA含量の減少が認められる。ドパミン神経細胞毒である1-methyl-4-phenylpyridinuim ion(MPP^+)はパーキンソン病類似症状を引き起こすことが知られている。MPP^+は細胞膜のDAトランスポーターを介してDA神経細胞に取り込まれ細胞死を引き起こすが、その細胞死がアポトーシスあるいはネクローシスであるか、さらに、その詳細な機序は何かが不明である。そこで、今回ヒト株化ニューロブラストーマSH-SY5Y細胞を用いてMPP^+による細胞死の機序について検討した。MPP^+は濃度依存的、時間依存的に細胞死のマーカーの一つである乳酸デヒドロゲナーゼの漏出(LDH leakage)を引き起こした。さらには、アポトーシスのマーカーであるDNA fragmentationも濃度依存的に引き起こした。一方、本細胞に内在的に発現するBcl-2(細胞死抑制蛋白質)はMPP^+処理により発現が増加した。この発現量の増加はプロテインキナーゼC阻害薬のスタウロスポリンの前処理によって抑制されたことから、MPP^+が内らかのリン酸化酵素の活性化を介し、Bcl-2発現を促進することが示唆された。なお、この細胞においてBcl-2の発現はプロテインキナーゼCにより促進され、プロテインキナーゼAにより、抑制されていることも見い出した。

Research Products

• [Publications] Itano Y.: "Biphasic effects of MPP^+, a possible parkinsonism inducer, on dopamine content and tyrosine hydroxylase mRNA expression in PC12 cells" Neurochem. Int.26. 165-171 (1995)
• [Publications] Kitamura Y.: "Inhibitory effects of pentamidine on N-methy 1-D-aspartate (NMDA)receptor/channels in the rat brain." Biol. Pharm. Bull.18. 234-238 (1995)
• [Publications] Kitamura Y.: "Inhibition by pentamidine on constitutive nitric oxide synthase in the brain: as a calmodulin antagonist." Europ. J. Pharmacol.289. 299-304 (1995)
• [Publications] Nishiya T.: "Herbimycin A suppresses NF-k B activation and tyrosine phosphorylation of JAK2 and the subsequent induction of nitric oxide synthase in C6・cells." FEBS Lett.371. 333-336 (1995)
• [Publications] 野村靖幸: "グリアでのNO産生とニューロン死." 「最新医学からのアプローチ(13)NO」. 144-156 (1995)