1995 Fiscal Year Annual Research Report

生体防御系に関与する遺伝子群及びタンパク質群の分子進化の研究

Research Project

Project/Area Number	07265219
Research Institution	Kyushu University
Principal Investigator	岩永貞昭九州大学, 理学部, 教授 (90029942)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	牟田達史九州大学, 理学部, 助手 (60222337)
Keywords	α_2マクログロブリン / カブトガニ体液 / 無脊椎動物 / ヒトα_2マクログロブリン / プロテアーゼインヒビター / 生体防御系 / 補体C8因子 / チオールエステル
Research Abstract	米国産カブトガニ(Limulus polyphemus)のα_2マクログロブリンのcDNAクローニングと全アミノ酸配列:α_2マクログロブリン(α_2M)は、血漿中に多量存在する高分子量プロテアーゼインヒビターであり、無脊椎動物から脊椎動物に至るまで数多くの種から単離されている。カブトガニもその血漿及び血球細胞内に多量のα_2Mを含み、様々なプロテアーゼに対し阻害活性を示す。また、最近、Limulus α_2Mが赤血球を溶血させる補体様活性を持つことが報告されている。本年度は、Limulus α_2Mの構造と機能の相関を明らかにする一歩として、全アミノ酸配列の決定を行った。精製α_2Mの部分アミノ酸配列を基にPCR primerを作製し、血球total RNAを鋳型としてRT-PCRによりプローブを調製し、血球cDNAライブラリーのスクリーニングを行った。得られた3種のオーバーラッピングクローンと5′RACE法を用いることにより、Limulus α_2MをコードとするcDNAの全塩基配列を決定した。Limulus α_2Mは25残基のシグナル配列と1482残基のインヒビ-領域から成り、他の哺乳類のα_2Mとの相同性は、それぞれ、ヒト28%、ラット28%、マウス29%であった。α_2Mファミリーの特徴であるthiol-esterドメイン近傍は高い相同性(ヒトα_2Mと54.4%)を示したが、N末端部分においてはα_2Mファミリーとの相同性は低く、むしろヒトC8のγ鎖と相同性の高い領域が存在した。また、ヒト、ラット、マウスのα_2M間で保存されている2つのinterchainのシステイン残基はLimulus α_2Mでは存在しなかった。

Research Products
(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] Tatsushi Muta: "Purified Horseshoe Crab Factor G: Reconstitution and Characterrization of the (1-3)-β-D-Glucan sensitive Serine Protease Cascade." J. Biol. Chem.270. 892-897 (1995)
[Publications] Yoshiki Miura: "Limulus Intracellular Coagulation Inhibitor Type 2: Purification, Characterization, cDNA Cloning, and Tissue Localization." J. Biol. Chem.270. 558-565 (1995)
[Publications] Tetsu Saito: "A Novel Type of Limulus Lectin-L6: Purification, Covalent Structure and Antivacterial Activity." J. Biol. Chem.270(24). 14493-14499 (1995)
[Publications] Tetsu Saito: "A Novel Big Sefensin Found in Horseshoe Crab Hemocytes: Isolation, Amino Acid Sequence and Antibacterial Activity." J. Biochem.117. 1131-1137 (1995)
[Publications] Shinji Nishida: "cDNA Cloning and Deduced Amino Acid Sequence of Prothrombin Activator (Ecarin) from Kenyan Echis carinatus Venom: Structural Difference between Ecarin and RVV-X(Russel′s Vipper Venom Factor X Activator)." Biochemistry. 34. 1771-1778 (1995)
[Publications] Kengo Fujimoto: "Nucleotide Sequence of the cDNA Encoding Prophenoloxidase Al of Drosophila melanogaster." Proc. Natl. Acad. Sci.92. 7769-7773 (1995)
[Publications] 岩永貞昭(分担執筆): "エンドトキシン-新しい治療・診断・検査" 講談社サイエンティフィク, 7 (1995)
[Publications] 津田博子(分担執筆): "血液凝固線溶異常-糖鎖の多様性を中心に-" 医学書院, 8 (1995)

1995 Fiscal Year Annual Research Report

生体防御系に関与する遺伝子群及びタンパク質群の分子進化の研究

Principal Investigator

岩永 貞昭 九州大学, 理学部, 教授 (90029942)

Research Products

[Publications] Tatsushi Muta: "Purified Horseshoe Crab Factor G: Reconstitution and Characterrization of the (1-3)-β-D-Glucan sensitive Serine Protease Cascade." J. Biol. Chem.270. 892-897 (1995)

[Publications] Yoshiki Miura: "Limulus Intracellular Coagulation Inhibitor Type 2: Purification, Characterization, cDNA Cloning, and Tissue Localization." J. Biol. Chem.270. 558-565 (1995)

[Publications] Tetsu Saito: "A Novel Type of Limulus Lectin-L6: Purification, Covalent Structure and Antivacterial Activity." J. Biol. Chem.270(24). 14493-14499 (1995)

[Publications] Tetsu Saito: "A Novel Big Sefensin Found in Horseshoe Crab Hemocytes: Isolation, Amino Acid Sequence and Antibacterial Activity." J. Biochem.117. 1131-1137 (1995)

[Publications] Shinji Nishida: "cDNA Cloning and Deduced Amino Acid Sequence of Prothrombin Activator (Ecarin) from Kenyan Echis carinatus Venom: Structural Difference between Ecarin and RVV-X(Russel′s Vipper Venom Factor X Activator)." Biochemistry. 34. 1771-1778 (1995)

[Publications] Kengo Fujimoto: "Nucleotide Sequence of the cDNA Encoding Prophenoloxidase Al of Drosophila melanogaster." Proc. Natl. Acad. Sci.92. 7769-7773 (1995)

[Publications] 岩永貞昭(分担執筆): "エンドトキシン-新しい治療・診断・検査" 講談社サイエンティフィク, 7 (1995)

[Publications] 津田博子(分担執筆): "血液凝固線溶異常-糖鎖の多様性を中心に-" 医学書院, 8 (1995)

岩永貞昭九州大学, 理学部, 教授 (90029942)