免疫不全症およびDNA修復欠損の原因遺伝子HYRCの特性と単離

1995 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07272228
• Research Institution: Hiroshima University
• Principal Investigator: 小松 賢志 広島大学, 原爆放射能医学研究所, 教授 (80124577)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 田内 広 広島大学, 原爆放射能医学研究所, 助手 (70216597) ; 丹羽 太貫 広島大学, 原爆放射能医学研究所, 教授 (80093293)
• Keywords: 免疫不全症 / scid / マウス重症複合型免疫不全症 / DNA修復欠損 / 放射線高感受性 / DNA2重鎖切断 / V(D)J組換え / マウス劣性遺伝病

Research Abstract

1.マウス重症複合型免疫不全症(scid)の放射線高感受性を合補するヒトの遺伝子を我々はヒト8番染色体8q11に初めてマッピングした。このDNA領域のコスミドから作製した数種類の遺伝的マーカーを1.7MbのYACクローン934g4をスクリーニングした。このYAC領域のゲノムDNAがDNA依存性蛋白キナーゼ触媒部位DNA-PKcs(旧HYRCおよびp350に代わる命名)をコードしていることがサザンブロットにより明らかとなった。
2.我々が作製したヒト/マウスscidハイブリッド細胞を用いたノーザンブロットはDNA-Pkcsの発現に一致して放射線感受性が回復することを示した。また、生化学的アッセイ法によりDNA-PK活性の回復した細胞でも同様に放射線感受性の回復が認められた。反対に、DNA-PK阻害剤により活性を低下した細胞ではDNA修復能が低下する傾向にあった。
3.以上のゲノムDNA解析および遺伝子発現からscidの原因遺伝子をDNA-PKcsと同定した。scid突然変異ではV(D)J組換えおよびDNA修復が欠損していることが知られている。scid細胞のキナーゼ活性欠損とこれら諸形質の関連性およびDNA-PKcsの機能について、細胞周期やシグナル伝達の我々の測定結果から検討を加えた。

Research Products

• [Publications] Endo, S., Komatsu, K., et. al.: "Neuton generator at Hiroshima University for use in Radiobiology study." J. Radiat. Res.36. 91-102 (1995)
• [Publications] Komatsu, K., et. al.: "The scid factor on human chromosome 8 restores both V(D)J recombination and double-strand breake repair." Cancer Res.55. 1774-1779 (1995)
• [Publications] Kimura, H., Komastu, K., et. al.: "Cultured cells from a severe combined immunodeficient mouse have a lower than normal rate of repair of potentially lethal damage sensitive to hypertonic treatment." Radiation Res.142. 176-180 (1995)
• [Publications] Natsuo, T., Komatsu, K., et. al.: "Inhibition of epidermal growth factor binding system by ionizing radiation in A431 human squamous carcinoma cells." Cancer Lett.89. 153-159 (1995)
• [Publications] Komatsu, K., et. al.: "The gene for Nijmegen Breakage Syndrome(V2) is not located on shromosome 11." Am. J. Hum. Genet.58(in press). (1996)
• [Publications] Honda, T., Komatsu, K., et. al.: "Spontaneous immortalization of cultured skin fibroblasts obtained from a high dose atomic bomb survivor." Mutation Res.(in press). (1996)
• [Publications] 小松賢志: "トリチウム生物影響「晩発効果・発がん」." 核融合(池上英雄他編,名古屋大学出版会,名古屋), 981(756-760) (1996)