1995 Fiscal Year Annual Research Report
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07273214
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
室伏 擴 東京大学, 大学院・理学系研究科, 助教授 (70101128)
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| Keywords | Xenopus卵 / DNA複製 / DNA複製開始因子 / DNAuntwisting因子 / DNAヘリカーゼ / HMGタンパク質 |
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| Research Abstract |
DNA Untwisting/Unwinding Factor(DUF)は、DNA複製開始に関与する因子として、筆者らによってXenopus卵抽出液から単離された。この因子は、140kDaと96kDaの2種のサブユニットから成り、DNAを負にねじる活性(untwisting活性)とDNAを巻き戻す活性(unwinding活性)を有し、二重鎖DNAを開いて、DNAポリメラーゼα-プライマーゼによるDNA合成を誘起する活性を持つことをすでに見いだしている。本研究では、Xenopus Oocyte cDNAライブラリーからクローニングを行い、96kDaサブユニット(以下、DUF96)の全長、および140kDaサブユニット(以下DUF140)の約90%のアミノ酸配列を決定した。
(1)DUF96:DUF96のC-末端付近には、HMG1,2タンパク質のDNA結合ドメイン(HMGボックス)と類似のアミノ酸配列が存在し、かつ、その両側に塩基性アミノ酸残基に富む部分が存在することがわかった。ホモロジー検索から、DUF96はマウスT160(V(D)J組換えのシグナル配列に結合する因子)およびヒトSSRP1(抗癌剤シスプラチン付加によって湾曲したDNAに結合する因子)と高い類似性を有することがわかった。
(2)DUF140:DUF140のN-末端近くにはDNAヘリカーゼモチーフが存在し、C-末端近傍には酸性アミノ酸配列に富む部分、および核移行シグナルと考えられる塩基性アミノ酸に富む部分が存在することが分かった。
以上の結果から、DUFのuntwisting活性は主としてDUF96に(DUF96と類似の構造を持つHMG1にはDNAuntwisting活性が見いだされている)、unwinding活性は主としてDUF140によって担われている可能性が高いと思われる。
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Research Products
(3 results)
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[Publications] Murakami-Murofushi,K.: "Selective inhibition of DNA polymerase-α family with chemically synthesized derivatives of PHYLPA,a unique Physarum lysophosphatidic acid" Biochim.Biophys.Acta. 1258. 57-60 (1995)
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[Publications] Ookata,K.: "Cyclin B interaction with microtubule-associated protein4(MAP4)targets p34^<CDC2> kinase to microtubules and is a potential regulator of M-phase microtubule dinamics." J.Cell Biol.128. 849-862 (1995)
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[Publications] Liliom,K.: "Xenopus oocytes express multiple receptors for LPA-like lipid mediators" Am.J.Physiol.(印刷中). (1996)
