1995 Fiscal Year Annual Research Report
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07273222
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| Research Institution | Tokyo Institute of Technology |
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Principal Investigator |
上代 淑人 東京工業大学, 生命理工学部, 寄附講座客員教授 (90012690)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小出 寛 東京工業大学, 生命理工学部, 寄附講座教員 (70260536)
佐藤 孝哉 東京工業大学, 生命理工学部, 寄附講座教員 (20251655)
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| Keywords | Ras / IL-3 / MAPチナーゼ / GTP結合タンパク質 / 細胞内シグナル伝達 |
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| Research Abstract |
Ras蛋白質を介するシグナル伝達系は、繊維芽細胞では細胞増殖、褐色細胞腫PC12細胞では神経分化に関与している。血球細胞においても、RasはIL-2、IL-3などのサイトカインや、T細胞レセプターからのシグナル伝達系で分子スイッチとして機能している。しかし、サイトカインのもつ増殖誘導、細胞死阻止、分化などの多面的な機能のうち、どの機能をRasが担っているのか明らかにされていない。そこで本研究ではこの点を明らかにすることを目的として、優性抑制変異体Ras(S17N)を誘導発現させるシステムを用い、IL-3依存性プロB細胞株BaF3でのIL-3からのシグナル伝達系におけるRasの機能を解析した。Ras(S17N)を誘導的に高発現するクローン(N6細胞)において、Rasの下流で機能しているMAPキナーゼのIL-3刺激によるリン酸化(活性化)を検討したところ、Ras(S17N)を誘導したときに阻害が認められた。そこで次にRas(S17N)存在下、非存在下でのN6細胞の増殖を細胞数の計測、およびMTT法により比較した。その結果、Ras(S17N)の発現は、N6細胞の増殖には全く影響しなかった。以上の結果から、BaF3細胞においては、1)IL-3刺激によるMAPキナーゼの活性化はRasを介すること、2)IL-3依存的な細胞増殖にはRasが必要ないことが明らかとなった。現在、同様の発現系を用いた、活性変異型Ras(G12V)の効果の検討などにより、IL-3からのシグナル伝達系におけるRasの機能をさらに詳細に解析中である。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Akiko Ito et al.: "G protein βr snbunit activates Ras. Rat. and MAP kimare in HEK 293 cells" FEBS Letl.368. 183-187 (1995)
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[Publications] Koji Terada et al.: "Ras in not reguired for the interleukin3-imolnced probteralri of a movre pro-B cell line, BaF3" J. Biol. Chem.270. 27880-27886 (1995)
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[Publications] Sadao Mari et al.: "Inhibition of Rae/Rat in teraction by anti-oncogenie mutants of neurobibromin, the nemafibuomatosis Tycel(NF1)gene podnit, in a All-free sep lene" J. Biol. Chem.270. 28834-28838 (1995)
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[Publications] Tomokazu Ohtsuka et al.: "Analysis of the T-cell activetrin signalirs pathnay mechiatel by tyrainihiniar protein kinpe C and Ras protein wlith is modrle-ted by introcellalin cyclic Amp." Biochem. Biophys: Acta. (印刷中). (1995)
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[Publications] Jimji Yamanchi et al: "Canboeye terminal of G protein β rnbunt in reguired for association with rsenlunit" Biochem, Bioghya. Res. Communs.214. 694-700 (1995)
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[Publications] Mika Miyake et al.: "Unfarnesylated trams for mis Ras mutant inbibits The Rai-signalns pathwny by formipa stable Rar. Rrt complex in the cytosal." FEBS Letl.378. 15-18 (1996)
