1995 Fiscal Year Annual Research Report

アポトーシスを司るエンドヌクレアーゼの構造と機能

Research Project

Project/Area Number	07273267
Research Institution	Tokyo University of Science
Principal Investigator	田沼靖一東京理科大学, 薬学部, 教授 (10142449)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	丸田英晴東京理科大学, 薬学部, 助手 (00266917) 内海文彰東京理科大学, 薬学部, 助手 (00256679)
Keywords	アポトーシス / エンドヌクレアーゼ / DNA断片化 / 細胞死 / ネクローシス
Research Abstract	アポトーシスの特徴であるDNAの断片化を司るエンドヌクレアーゼに焦点を絞り、その実体の同定とcDNAクローニングを行うことによって、その構造と機能を解明することを目的とした。 X線照射によってアポトーシスを誘発させたラット胸腺細胞の核からアポトーシスを司るエンドヌクレアーゼを完全精製し、その性状を詳細に解析した。その結果、新規な核型エンドヌクレアーゼであることが判明し、DNaseγと名付けた。本酵素は、分子量33kDaのCa^<2+>/Mg^<2+>-依存性の中性エンドヌクレアーゼであることが判明した。DNaseγの精製標品をリシルエンドペプチダーゼ、又はアスパルティックエンドペプチダーゼで処理し、得られたペプチドをHPLCにより分取し、気相アミノ酸シークエンサーによってそれらの部分アミノ酸配列を決定した。これらの部分アミノ酸配列を基にプローブを作製し、ラット胸腺cDNAライブラリーよりクローニングを行ない、その全塩基配列を決定した。このcDNAより予想されるアミノ酸配列から、DNaseγはN末端にプリカーサーペプチドを有することがわかった。また興味深いことに、このプリカーサー領域にはロイシンジッパーが存在していた。一方、C末端には核移行シグナルがあり、内部にDNaseIと類似した酵素活性中心があることが明らかとなった。

Research Products

(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] Sei-ichi Tanuma: "Induction of autoantibodies in normal mice by injection of nucleobindin and natural occurrence of antibodies against nucleobindin in autoimmune MRL/lpr/lpr mice." Immunol. Lett.45. 35-42 (1995)
[Publications] Sei-ichi Tanuma: "A Macrocircular ellagitannin, oenothein B, supresses mouse mammary tumor gene expression via inhibition of poly(ADP-ribose)glycohydrolase." Biochem. Biophys. Res. Commun.210. 329-337 (1995)
[Publications] Sei-ichi Tanuma: "Induction of apoptosis by T2 toxin and other natural toxins in HL-60 human promyelotic leukemia cells." Natural Toxins. 3. 129-137 (1995)
[Publications] Sei-ichi Tanuma: "DNA fragmentation in apoptosis." Tiss. Cult. Res. Commun.53. 1-9 (1995)
[Publications] Sei-ichi Tanuma: "Molecular mechanisms of apoptosis." Sut. Bull.12. 36-43 (1995)
[Publications] Sei-ichi Tanuma: "An endonuclease responsible for apoptosis." Aopotosis: Prog. Mol. Subcell. Biol.32. 1-12 (1995)
[Publications] 田沼靖一: "アポトーシス -細胞の生と死-" 東京大学出版会, 145 (1994)
[Publications] 田沼靖一: "アポトーシス -機能と機構-" 日経サイエンス社, 213 (1995)

1995 Fiscal Year Annual Research Report

アポトーシスを司るエンドヌクレアーゼの構造と機能

Principal Investigator

田沼 靖一 東京理科大学, 薬学部, 教授 (10142449)

Research Products

[Publications] Sei-ichi Tanuma: "Induction of autoantibodies in normal mice by injection of nucleobindin and natural occurrence of antibodies against nucleobindin in autoimmune MRL/lpr/lpr mice." Immunol. Lett.45. 35-42 (1995)

[Publications] Sei-ichi Tanuma: "A Macrocircular ellagitannin, oenothein B, supresses mouse mammary tumor gene expression via inhibition of poly(ADP-ribose)glycohydrolase." Biochem. Biophys. Res. Commun.210. 329-337 (1995)

[Publications] Sei-ichi Tanuma: "Induction of apoptosis by T2 toxin and other natural toxins in HL-60 human promyelotic leukemia cells." Natural Toxins. 3. 129-137 (1995)

[Publications] Sei-ichi Tanuma: "DNA fragmentation in apoptosis." Tiss. Cult. Res. Commun.53. 1-9 (1995)

[Publications] Sei-ichi Tanuma: "Molecular mechanisms of apoptosis." Sut. Bull.12. 36-43 (1995)

[Publications] Sei-ichi Tanuma: "An endonuclease responsible for apoptosis." Aopotosis: Prog. Mol. Subcell. Biol.32. 1-12 (1995)

[Publications] 田沼靖一: "アポトーシス -細胞の生と死-" 東京大学出版会, 145 (1994)

[Publications] 田沼靖一: "アポトーシス -機能と機構-" 日経サイエンス社, 213 (1995)

田沼靖一東京理科大学, 薬学部, 教授 (10142449)