インフルエンザウイルスの複製に機能する細胞核の役割と核・細胞質間輸送の制御機構

1995 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07282204
• Research Institution: Kanazawa University
• Principal Investigator: 榎並 正芳 金沢大学, 医学部, 助教授 (30168794)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 置塩 信行 金沢大学, 医学部, 助手 (20262561)
• Keywords: インフルエンザウイルス / 細胞内輸送 / 温度感受性変異株 / マトリクス蛋白質 / NS1蛋白質 / NS2蛋白質 / ウイルス複製

Research Abstract

研究目的:インフルエンザウイルスの遺伝子は8種類のマイナス鎖RNAから成り、NP蛋白質が結合したRNP構造を形成している。ウイルスが細胞に感染すると、RNPは核内へ移行し複製される。感染後期に至ると、新たに複製されたRNPは細胞質へ移行し、ウイルス粒子に取り込まれる。本研究では、ウイルスRNPの核内複製様式、核・細胞質間輸送機構、並びにこれらの制御機構を解明する事を目的する。本年度は、1)核・細胞質間輸送に欠損を持つM1蛋白質温度感受性変異株、細胞内発現系等を用いたの解析から、M1蛋白質、並びにこれと相互作用する蛋白質の同定と、核・細胞質間輸送の制御に於ける役割を知る。2)M1蛋白質、並びにこれと相互作用する事が示唆される非構造蛋白質NS1、NS2と相互作用する宿主蛋白質の同定を、酵母Two‐hybrid systemを用い行う。
研究成果:1)変異M1蛋白質は1アミノ酸の変化から成っており、この変異によりM1蛋白質の合成直後の核移行が促進されるが、これには、N52蛋白質が関与していた。感染細胞の核内に存在するRNPには、M1蛋白質に加えNS1及びNS2蛋白質が結合した複合体構造を取っており、細胞質への移行に関与していると考えられた。2)NS1蛋白質と相互作用する宿主蛋白質として、少なくとも、hUBC9遺伝子産物(Human ubiqutin conjugating enzyme)、及びNF90遺伝子産物(Human nuclear factor 90)が同定された。これら蛋白質相互作用の生物学的意義については、今後の解析を必要とする。

Research Products

• [Publications] T.A.Sato: "Isolation of the Measles Virus Hemagglutinin Protein in a Soluble Form by Protease Digestion" Journal of Virology. 69. 513-516 (1995)
• [Publications] 榎並正芳: "ネガティヴ鎖RNAウイルスの遺伝子操作-最近の展開-" ウイルス. 45. 145-157 (1995)
• [Publications] 榎並正芳: "ウイルス実験プロトコール、永井美之・石浜明監修,小林信之・永田恭行編集" メジカルビュー社, 360 (1995)