魚類生殖現象の分子機構

1996 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07306021
• Research Institution: HOKKAIDO UNIVERSITY
• Principal Investigator: 山内 晧平 北海道大学, 水産学部, 教授 (10109514)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 松山 倫也 九州大学, 農学部, 助教授 (00183955) ; 長浜 嘉孝 岡崎国立共同研究機構, 基礎生物学研究所, 教授 (50113428) ; 隆島 史夫 東京水産大学, 資源育成学科, 教授 (60041703) ; 川内 浩司 北里大学, 水産学部, 教授 (70050523) ; 金子 豊二 東京大学, 海洋研究所, 助手 (70221190) ; 会田 勝美 東京大学, 農学部, 教授 (50012034) ; 安東 宏徳 北海道大学, 理学部, 助手 (60221743)
• Keywords: GnRH / GTH / ソマトラクチン / コネクシン / 20β-HSD / P450c17 / エストロゲン受容体 / 分子機構

Research Abstract

(視床下部)サクラマス、大西洋サケおよびヒメマスにおいて、二種類のサケ型生殖腺刺激ホルモン放出ホルモン遺伝子(sGnRH-Iと-II)の5'上流域の構造解析を行ない、約1.2kbからなるパリンドローム配列(PS-IIa)が、ヒメマスでは大部分欠失していることを明らかにした。また、sGnRH遺伝子の発現動態をin situハイブリダイゼーションにより解析し、成熱の進行共にPreoptic area (POA)とVentral telencephalon (VT)においてsGnRHを発現している細胞が増加することを明らかにした。(脳下垂体)ロシアチョウザメGTHIIβ鎖のcDNAの塩基配列を決定した。また、GTH抗血清を用いた免疫組織染色により、シロチョウザメ脳下垂体主葉後部の細胞をGTH産生細胞と同定した。また、ソマトラクチンが血液の酸・塩基調節に関与している可能性を示唆した。(生殖腺)ニジマス卵巣から単離した2種の17α-水酸化酵素cDNAは単一の遺伝子からオルタネイティブスプライシングにより合成されることを明らかにした。また、ニジマスの卵巣から20β-HSDcDNAをクローニングした。さらに、魚類の卵成熟能獲得時に大切な役割を果たしていると考えられる2種類のギャップ結合タンパク質(コネクシン)cDNA(Cx32.2, Cx32.7)を大西洋産ニベ卵巣よりクローニングした。Cx32.2はGTH処理によりその発現量が急増することを明らかにした。(肝臓)ウナギ雌肝臓において、成熟に伴うエストラジオール-17β受容体の発現変化を明らかにした。

Research Products

• [Publications] Hiraoka et al.: "Effects of osmotic stimulation on expression of neurohypophysial hormone genes in pre-spawning chum salmon." Zool. Sci.13. 737-745 (1996)
• [Publications] Kakizawa et al.: "Elevation of plasma somatolactin concentrations during acidosis in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss)." J. Exp. Biol.199. 1043-1051 (1996)
• [Publications] Kobayashi et al.: "Steroidogenesis in the ovarian follicles of the medaka (Oryzias latipes) during vitellogenesis and oocyte maturation." Zool. Sci.13. 921-927 (1996)
• [Publications] Todo et al.: "Molecular cloning and characterization of Japanese eel estrogen receptor cDNA." Mol. Cell. Endocrinol.119. 37-45 (1996)
• [Publications] Kakizawa et al.: "Effects of hypothalamic factors on somatolactin secretion from the organ-cultured pituitary of rainbow trout." Gen. Comp. Endocrinol.105. 71-78 (1997)
• [Publications] Amano et al.: "Distribution and function of gonadotropin-releasing hormone (GnRH) in the teleost brain." Zool. Sci.(in press).
• [Publications] Amano et al.: "Activation of salmon GnRH mRNA expression prior to differentiation of precocious males in masu salmon." Gen. Comp. Endocrinol.(in press).
• [Publications] Amano et al.: "The maturation of the salmon GnRH system and its regulation by gonadal steroids in masu salmon." Fish Physiol. Biochem.(in press).
• [Publications] Hiraoka et al.: "Changes in expression of neurohypophysial hormone genes during spawning migration in chum salmon, Oncorhynchus keta." J. Mol. Endocrinol.(in press).