1998 Fiscal Year Annual Research Report

冠動脈の緊張亢進や内膜肥厚の防止に関する細胞分子生物学的研究

Research Project

Project/Area Number	07407022
Research Institution	KYUSHU UNIVERSITY
Principal Investigator	金出英夫九州大学, 医学部, 教授 (80038851)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	平野勝也九州大学, 医学部, 講師 (80291516) 西村淳二九州大学, 医学部, 助教授 (90237727)
Keywords	血管平滑筋 / 内皮細胞 / 血管管腔形成 / ミオシン脱燐酸化酵素 / 細胞増殖接触抑制 / 細胞周期
Research Abstract	本研究の目的は、平滑筋細胞の緊張・増殖制御の細胞分子生物学的解明。以下の成果を得た。 (1) 血管平滑筋ミオシン軽鎖脱リン酸化酵素は触媒サブユニット(38KD)と大(130KD)、小(20KD)の調節サブユニットからなる3量体である。トライトンX-100スキンド血管標本の発生張力を測定し、Ca収縮に及ぼす130KDとその変異体の影響を解析したところ、130KDのN末端領域は、脱リン酸化酵素を阻害することで、血管平滑筋収縮を増強(Ca感受性増大)することが明らかとなった。この作用には酸性アミノ酸集積領域が重要であった。 (2) 20KDをスキンド標本に投与したところ、Ca収縮が増強した。この作用には、20KDのN末端78個のアミノ酸配列が重要であった。 (3) 内皮細胞にも130KDが発現すること、したがって、内皮細胞のミオシン脱リン酸化反応にも平滑筋と同様の調節機構が存在することを証明した。この130KDのクローニングを行った。接触により増殖を停止した内皮細胞において、130KDは膜蛋白質の脱リン酸化反応の調節に関与する可能性を示した。一方、接触による増殖停止には主に2A型脱リン酸化酵素が関与することを示した。従って、内皮細胞の増殖や、接触による増殖抑制において、ミオシンのリン酸化反応が重要な役割を演じている可能性が高いことが明らかとなった。 (4) コラーゲンゲル内の内皮細胞の管腔形成にはSKF96365感受性のCaの細胞内流入が不可欠であることを証明した。 (5) 培養内皮細胞に線状の剥離創をつくり、この創の内皮細胞再生過程を観察した。Rhoキナーゼは内皮細胞のストレスファイバーの出現に関与するが、再生過程自体には影響しなかった。

Research Products

(11 results)

All Other

All Publications (11 results)

[Publications] Zhou YB: "Expression and function of α_1-adrenocepter subtypes in the procine renal artery." Eur J Pharmacol. 341. 95-103 (1998)
[Publications] Ahmed A: "DIfferential effects of Ca^<2+> channel blockers on Ca^<2+> transients and cell cycle progression i n vascular smooth muscle cells." Eur J Pharmacol. 344. 323-331 (1998)
[Publications] Seguchi H: "Expression of β3-adrenoceptors in rat detrusor smooth mascle." J Urology. 159. 2197-2201 (1998)
[Publications] Mizuno O: "Mechanism of endothelium-dependent relaxation induced by throumbin in the pig coronary artery." Eur J Pharmacol. 351. 67-77 (1998)
[Publications] Niiro N: "Mechanisms and mode of action for galanin-induced contraction in the rat myometrium" Br J Pharmacol. 124. 1623-1632 (1998)
[Publications] Kawasaki J: "Mechanisms of vascorelaxation induced by troglitazone,a novel anti-diabetics,in the porcine coronary aretery." Circulation. 98. 2446-2452 (1998)
[Publications] Hirano M: "Expression,subcellular localization and cloning of the 130 kDa regulatory subunit of myosin phosphatase in porcine endothelial cells." Biochem Biophys Res Commun. 254. 490-496 (1999)
[Publications] Yasutsune T: "Vasorelaxation and inhibition of the voltage-orerated Ca^<2+> channels by FK506 in porcine" Br J Pharmacol. in press.
[Publications] Zhou YB: "The exogeneously added small subunit of smooth muscle myosin phosphatase increases the Ca^<2+> sensitivity" Biochem biophys. in press.
[Publications] Zhou YB: "NH_2-terminal fragments of 130 kDa subunit of myosin phosphatase increases Ca^<2+> sensitivity of the porcine renal artery." J Physiol. in press.
[Publications] Kanaide H: "Methods in Molecular Biology,Vol.114:Calcium Sign aling Protocols,Edited by DG Lambert" Humana Press Inc.Totowa,NJ, 269-277 (1999)

1998 Fiscal Year Annual Research Report

冠動脈の緊張亢進や内膜肥厚の防止に関する細胞分子生物学的研究

Principal Investigator

金出 英夫 九州大学, 医学部, 教授 (80038851)

Research Products

[Publications] Zhou YB: "Expression and function of α_1-adrenocepter subtypes in the procine renal artery." Eur J Pharmacol. 341. 95-103 (1998)

[Publications] Ahmed A: "DIfferential effects of Ca^<2+> channel blockers on Ca^<2+> transients and cell cycle progression i n vascular smooth muscle cells." Eur J Pharmacol. 344. 323-331 (1998)

[Publications] Seguchi H: "Expression of β3-adrenoceptors in rat detrusor smooth mascle." J Urology. 159. 2197-2201 (1998)

[Publications] Mizuno O: "Mechanism of endothelium-dependent relaxation induced by throumbin in the pig coronary artery." Eur J Pharmacol. 351. 67-77 (1998)

[Publications] Niiro N: "Mechanisms and mode of action for galanin-induced contraction in the rat myometrium" Br J Pharmacol. 124. 1623-1632 (1998)

[Publications] Kawasaki J: "Mechanisms of vascorelaxation induced by troglitazone,a novel anti-diabetics,in the porcine coronary aretery." Circulation. 98. 2446-2452 (1998)

[Publications] Hirano M: "Expression,subcellular localization and cloning of the 130 kDa regulatory subunit of myosin phosphatase in porcine endothelial cells." Biochem Biophys Res Commun. 254. 490-496 (1999)

[Publications] Yasutsune T: "Vasorelaxation and inhibition of the voltage-orerated Ca^<2+> channels by FK506 in porcine" Br J Pharmacol. in press.

[Publications] Zhou YB: "The exogeneously added small subunit of smooth muscle myosin phosphatase increases the Ca^<2+> sensitivity" Biochem biophys. in press.

[Publications] Zhou YB: "NH_2-terminal fragments of 130 kDa subunit of myosin phosphatase increases Ca^<2+> sensitivity of the porcine renal artery." J Physiol. in press.

[Publications] Kanaide H: "Methods in Molecular Biology,Vol.114:Calcium Sign aling Protocols,Edited by DG Lambert" Humana Press Inc.Totowa,NJ, 269-277 (1999)

金出英夫九州大学, 医学部, 教授 (80038851)