1996 Fiscal Year Annual Research Report
感染症・免疫疾患におけるレドックス制御異常の分子生物学的解析
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07407071
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
淀井 淳司 京都大学, ウイルス研究所, 教授 (80108993)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
堀 利行 京都大学, ウイルス研究所, 助手 (70243102)
前田 道之 京都大学, 胸部疾患研究所, 助教授 (20027329)
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| Keywords | ヒトthioredoxin / レドックス制御 / phagocyte oxidase / シクロヘキシミド / TGF-β / 核タンパク質 / Yeast two hybrid / cis-element |
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| Research Abstract |
本研究は、ADF/thioredoxin (TRX)を主とした細胞内外のレドックス状態の変化や細胞の調節機構について、分子生物学的手法を用いて解析を行うことを目的としている。これまでに、ADF/TRXと相互作用を持つタンパク質の同定に関して新しい知見が得られている。
まずこれまでにADF/TRXと相互作用を持つタンパク質の検出を目的としYeast Two-Hybridアッセイを行い、phagocyte oxidaseの構成分子の一つであるp40phox、およびミンクで同定されているシクロヘキシミドにより誘導されTGF-βにより発現が抑制されるTRT407-2のヒトhomologueというADF/TRX結合タンパク質の候補を得ている。さらにこれらの全長cDNAを用いたYeast Two-Hybridアッセイによりそれぞれ陽性の結果を得ている。また、Yeast Two-Hybridアッセイ以外の方法として抗ADF/TRX抗体を用いた免疫沈降法により、分子量60kDのタンパク質を検出している。このタンパク質についてはsubcellular fractionationによりADF/TRXと60kDのタンパク質の複合体が核分画から検出されることがわかっている。今後これらのADF/TRXと相互作用を持つタンパク質については、詳細な検討を行う予定である。
また、これらの他にADF/TRX遺伝子の転写調節部位に存在し、ADF/TRX発現の酸化ストレスへの反応に必要と考えられる特異的なelementに関して、このelementに結合するDNA結合タンパク質の精製を進めている。
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[Publications] Minoru Matsui: "Early embryonic lethality caused by targeted distruction of the mouse thioredoxin gene" Developmental Biology. 178. 179-185 (1996)
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[Publications] Yoshihisa Taniguchi: "A novel promoter sequence is involved in the oxidative stress-induced expression of the adult T-cell derived factor (ADF) /human thioredoxin (Trx) gene" Nucleic Acid Research. 24. 2746-2752 (1996)
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[Publications] Hajime Nakamura: "Redox Regulation of Cellular Activation" Annual Reviews of Immunology. 15. 351-369 (1997)
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[Publications] Nomizu Hirakawa: "Suppression of sialyl Lewis X expression and E-selectin-mediated cell adhesion in cultured human lymphoid cells by transfection of antisense cDNA of an alphal-->3 fucosyltransferase (Fuc-T VII)." J Biol Chem. 271. 31556-31561 (1996)
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[Publications] Hiroshi Fujiwara: "A differentiation antigen of human large luteal cells in corpora luteal lutea of the menstrul cycle and early pregnancy" Biol.Reprod.54. 1173-1183 (1996)
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[Publications] Akihiro Imura: "The human OX40/gp34 system directly mediates adhesion of activated T cells to endothelial cells." J.Exp.Med.183. 2185-2195 (1996)
