気管支喘息難治化に関与する気道上皮、T細胞、肥満細胞、好酸球間ネットワークの研究

1995 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07407072
• Research Category: Grant-in-Aid for General Scientific Research (A)
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 伊藤 幸治 東京大学, 医学部(病), 教授 (10008310)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 庄司 俊輔 東京大学, 医学部(病), 助手 (10171018) ; 滝沢 始 東京大学, 医学部(病), 助手 (80171578) ; 須甲 松信 東京大学, 医学部(病), 講師 (80107622) ; 奥平 博一 東京大学, 医学部(病), 講師 (30106645) ; 森田 寛 東京大学, 医学部(病), 助教授 (60107620)
• Keywords: 気管支喘息 / 気管支上皮細胞 / T細胞 / 好酸球 / 肥満細胞 / サイトカイン / フィブロネクチン / 接着因子

Research Abstract

正常および軽症気管支喘息患者から気管支ファイバースコープ下にブラシにより気管支上皮細胞を回収して、その培養とリバーストランスクリプション・ポリメラーゼ反応(RTPCR)によるサイトカインの遺伝子発現を検討した。その結果、IL-8,GM-CSFの産生と遺伝子発現が喘息患者においてより増強していることが認められた。また、リンパ球、肥満細胞および好酸球への遊走活性をボイデン法により検討した。ヒト気管支上皮細胞の培養上清中にはこれらの炎症性細胞への遊走活性が存在し、かつその活性はリンパ球と好酸球に対しては喘息由来の上皮からの方が強かった。現在、その活性物質の解析中である。また、ヒト気管支上皮細胞と好酸球との接着の制御について検討した。好酸球側では血小板活性化因子(PAF)が、上皮側ではTNFαやインターフェロンγがそれぞれ接着増強因子として作用した。好酸球からのECPやIC-8の産生は接着により亢進した。好酸球の培養上清には気道上皮からのサイトカイン産生刺激活性が認められた。このように、喘息の気道炎症病態で重要な炎症性細胞と気道上皮は相互に緊密なサイトカインネットワークを形成していることが明らかとなった。また、牛気管支上皮培養上清はラット好塩基性白血病細胞(ヒト肥満細胞と同性質)を遊走させる物質が検出され、フィブロネクチンであることが判明した。好酸球の遊走、寿命延長、活性化に関与するIL-5はアトピー性、非アトピー性気管支患者の両方のCD4^+T細胞で産生亢進がホルボールエステル+イオノマイシンによる非特異刺激で検出された。ステロイド、マクロライド系抗生物質、免疫抑制薬は気管支上皮およびT細胞からのサイトカイド産生を抑制した。

Research Products

• [Publications] Takizawa,H.,Desaki,M.,Ito,K.,et al.: "Erythromycin suppresses interleukin 6 expression by human bronchial epitheliall cells." Biochem.Biophys.Res.Commun.210. 781-786 (1995)
• [Publications] Takizawa,H.,Ohtoshi,T.,Ito,K.,et al.: "Histamine octivates bronchial epithelial cells to release in flammatory cytokines in vitro." Int.Archv.Appl.Immund.108. 260-268 (1995)
• [Publications] Takizawa,H.,Ohtoshi,T.,et al.: "Interleukin-6 receptor expression in human bronchial epithelial cells." Am.J.Physiol.(in press). (1996)
• [Publications] 滝沢始,大利隆行,伊藤幸治,他: "ヒト気道上皮細胞のサイトカイト発現および産生に対するマクロライド抗生物質の影響" 日気食会報. (in press). (1996)
• [Publications] 幸山正,滝沢始,伊藤幸治,他: "好酸球のIL-8産生に対するマクロライド系抗生物質の影響" The Japanese Journal of Antibiotics. (in press). (1996)
• [Publications] Shoji,S.,et al.: "Cigarette smoke stimulates releess of neutrophil chemotactic octivity from cultured bovine bronchial epithelial cells." Clinied Science. 88. 337-344 (1995)
• [Publications] 岡崎仁,滝沢始,伊藤幸治,他.: "気道上皮からのIL-8産生の方向性に及ぼすDEP(Diesel Exhaust Partides)の影響" 臨床呼吸生理. 27. 37-44 (1995)
• [Publications] Mori,A.,Suko,M.,Okudaira,H.,et al.: "Interleukin-5 production by CD4 T cells of asthmatic patients is suppressed by qlucocorticoids and the immunosuppressant FK506 and cyclosporin A." Int.Immunol.7. 449-453 (1995)
• [Publications] Mori,A.,Suko,M.,Okudaira,H.,et al.: "Allergen specific T cell clones produce IL-5 upon stimulation with Th1 cytokive,IL-2." Int.Arch.Allergy Immunol.107. 220-222 (1995)
• [Publications] Mori,A.,Okudaira,H.,Ito,K.,et al.: "Aralysis of human IL-5 gene transcription by T cell cloves and hydridomas." Int.Arch.Allergy Immunol.107. 366-367 (1995)
• [Publications] Okudaira,H.,Mori,H.,Ito,H.,et al.: "Evhanced production and gene expression of IL-5 in Patients with brovchial asthma-possible management of atopic diseases by downregulation of IL-5 gen tionscriptic." Int.Arch.Allergy Immunol.107. 255-258 (1995)
• [Publications] Nagai,S.,Morita,Y.,et al.: "Pharmacological study of stem cell factor-induced mast cell histamine release with kinase tnhibitors." Biochem.Biophys.Res.Commun.208. 576-581 (1995)
• [Publications] Miyamasu,M.,Morita,Y.,et al.: "Chemotactic agonists induce cytokine production in eosinephils." J.Immunol.154. 1339-1349 (1995)
• [Publications] Yamaguchi.M.,Morita,Y.,et al.: "A beta2-agonist,procaterol inhibits bosophil migration." J.Asthma.32. 125-130 (1995)
• [Publications] 滝沢始: "喘息の基礎から臨床まで(伊藤幸治編)/気道上皮の役割" 医薬ジャーナル社(大阪), 75-79(309) (1995)
• [Publications] 滝沢始: "Annual Review 呼吸器(工藤翔二、他編)/14員環マクロライド抗生物質の抗炎症作用" 中外医学社(東京), 184-191 (1996)
• [Publications] 滝沢始: "炎症、免疫とマクロライドUp to Date(清水喜八郎,他編)/気道上皮細胞に対する作用-サイトカイン産生" 医薬ジャーナル社(東京)(in press), (1996)
• [Publications] Mori,A.,Ito,K., Okudaira,H.,et al.: "Molecular Biology of Allergens and the Atopic Immune Rospovse (A.Sehon,et al.ed)/Enhanced production and gene expression of IL-5 in bronchial asthma-possible management of atopic disease with IL-5 specific gene transription inhibitor." Plenum Press(New York)(in press), (1995)
• [Publications] Okudaira,H.,Mori,A.,Suko,M.,et al.: "Progress in Allergy and Clinical Immunclogy Vol.3(S.G.O.Johonsson ed/Treatment of atopic diseases with glucocorticoids,cyclosporin A and FK506." Hogrefe & Huber Publishers(Germeny), 311-316 (1995)