1995 Fiscal Year Annual Research Report
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07456054
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Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
長澤 寛道 東京大学, 海洋研究所, 教授 (60134508)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
渡辺 俊樹 東京大学, 海洋研究所, 助教授 (00272526)
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| Keywords | 甲殼類 / クルマエビ / アメリカザリガニ / 神経ペプチド / ペプチドホルモン / 血糖上昇ホルモン / 脱皮抑制ホルモン |
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| Research Abstract |
クルマエビとアメリカザリガニの活きた材料から眼柄つを切り取り、サイナス腺を摘出した。クルマエビのサイナス腺を30%アセトニトリル/2%食塩水中でホモジナイズし、その遠心上清を直接逆相HPLCにかけ、合計6個の主要なペプチドを分取した。これらを溶出順にPej-SGP-I VIと名付けた。質量分析の結果、これらはいずれも分子量が8300-9100であり、N末端アミノ酸配列分析の結果、これらはすべて既に他の甲殼類から得られているCHHペプチドに属することがわかった。これら6個のペプチドすべてについて全アミノ酸配列を決定した。その結果、IVを除く5つのペプチドはすべて72アミノ酸残基からなり、C末端はアミド化されていた。一方、IVは77残基からなり、C末端は遊離のカルボキシル基であった。IVのみが脱皮抑制活性を示し、残りのペプチドはすべて血糖上昇活性を示した。IIIに対応する2本鎖DNAを化学合成し、バキュロウィルスに組み込んだ。現在、これをカイコの培養細胞を用いて発現を検討中である。また、上記のペプチドの卵黄形成抑制活性について、卵巣のin vitro培養系を用いて予備的に調べたところ、1サイナス腺相当量ですべてのペプチドが卵巣のタンパク合成を抑制することがわかった。これについてはさらに検討中である。
アメリカザリガニのサイナス腺についても同様にして抽出し、脱皮抑制ホルモンを単離し、全一次配列を決定したところ、75アミノさん残基からなり、C末端はアミド化されていることがわかった。このペプチドはクルマエビのIVと約50%相同性を示した。
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[Publications] Wei-jun Yang et al.: "Amino acid sequences of a hyperglycaemic hormone and its related peptides from the Kuruma prawn" Aquaculture. 135. 205-212 (1995)
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[Publications] Wei-jun Yang et al.: "Amino acid sequences of a peptide with molt-inhibiting activity from the Kuruma prawn Penaeus japonicus" Peptides. (印刷中). (1996)
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[Publications] Hiromichi Nagasawa et al.: "Isolation and amino acid sequence of a molt-inhibiting hormone from the American crayfish, Procambarus clarkii" Biosci. Biotech. Biochem.(印刷中). (1996)
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[Publications] Akiko Terauchi et al.: "Isolation of a molt-inhibiting hormone from the sinus gland of the crayfish,Procambarus clarkii" Zool. Sci.(印刷中). (1996)
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[Publications] 長澤寛道(分担執筆): "昆虫の生化学・分子生物学" 名古屋大学出版会, 498 (1995)
