1995 Fiscal Year Annual Research Report

血液-組織関門における物質輸送の分子細胞形態学的研究

Research Project

Project/Area Number	07457002
Research Category	Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
Research Institution	Gunma University
Principal Investigator	高田邦昭群馬大学, 生体調節研究所, 教授 (20129290)
Keywords	糖輸送体 / 血液-組織関門 / 胎盤 / ギャップ結合 / コネキシン / 上皮細胞 / キメラ遺伝子 / 低分子量G蛋白
Research Abstract	1.促進拡散型輸送体蛋白質の各種アイソフォームを特異的に認識する抗体を,蛋白のC-末端のペプチド用いてモルモットとウサギで作製した.これらを用いて二重染色をおこなう方法を確立した. 2.血液-組織関門のなかで,二層の上皮細胞層によって関門が構成されているとき,その間がギャップ結合によって結合されている.ギャップ結合蛋白質のコネキシンアイソフォームについて検索したところ,ラット胎盤合胞体細胞ではコネキシン26,毛様体上皮細胞ではコネキシン43がこれら2層の上皮細胞間に多量に存在し,細胞質間のチャンネルを形成しているのを見出した.以上のことから,糖輸送体GLUT1,コネキシン,GLUT1からなる機構が,これらの系での糖の関門通過にはたらいていると考えられる. 3.ラット胎盤では,糖輸送体GLUT3が多量に発現しているのを見出した.免疫染色によりGLUT3は,GLUT1とは異なる局在を示した.上記のGLUT1とコネキシンを介する糖通過機構に加えて別にあるいは共同して働いていると考えられる.電子顕微鏡レベルでのさらに詳細な検討を計画している. 4.リポフェクション法を用い,極性を持った培養上皮細胞であるMDCK細胞で,糖輸送体のcDNAを発現させた.能動輸送型糖輸送体のSGLT1を発現させた細胞では頂部形質膜に局在し,細胞での局在をきめる情報がこの分子内にあるのが判明した. 5.糖輸送体GLUT5とGLUT1のキメラ遺伝子を培養上皮細胞であるCaco2細胞で発現させると,ある種のキメラ蛋白は頂部に局在するが,別のキメラ蛋白は基底側壁部,ないしは細胞全周に局在するのが判明した.現在さらに詳細に解析中である. 6.低分子量G蛋白に対する抗体は,これらの蛋白の部分ペプチドを合成して抗原とし,ウサギとモルモットを免疫して作製中で,並行してその特性を検討中である.

Research Products
(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] Kurosaki M: "Immunohistochemical Localizaation of the glucose transporter in choroid plexus papillomas." Brain Tumor Pathol. 12. 69-73 (1995)
[Publications] Yoshida A: "Immunohistochemical Localization of Na^+-dependent glucose transporter in the rat digestive tract." Histochem J. 27. 420-426 (1995)
[Publications] Nagase Y: "Immunohistochemical Localization of glucose transporters in human renal cell carcinoma." J Urol. 153. 798-801 (1995)
[Publications] Ozawa H: "The granin family-its role in sorting and secretory granule formation." Cell Struct Funct. 20. 415-420 (1995)
[Publications] Inukai K: "Characterization of rat GLUT5 and functional analysis of chimeric proteins of GLUT1 glucose transporter and GLUT5 fructose transporter." Endocrinology. 136. 4850-4857 (1995)
[Publications] Ogihara H.: "Immuno-localization of H^1/peptide cotransporter in rat digestive tract." Biochem Biophys Res Commun. (in press).
[Publications] 高田邦昭(分担): "大食細胞.電子顕微鏡でみるミクロの世界-生物系-" (日本電子顕微鏡学会編)学際企画,東京, 2 (1995)
[Publications] 高田邦昭(分担): "糖の吸収と配分の分子機構にみる,人体の世界" 読売新聞社,東京, 1 (1995)

1995 Fiscal Year Annual Research Report

血液-組織関門における物質輸送の分子細胞形態学的研究

Principal Investigator

高田 邦昭 群馬大学, 生体調節研究所, 教授 (20129290)

Research Products

[Publications] Kurosaki M: "Immunohistochemical Localizaation of the glucose transporter in choroid plexus papillomas." Brain Tumor Pathol. 12. 69-73 (1995)

[Publications] Yoshida A: "Immunohistochemical Localization of Na^+-dependent glucose transporter in the rat digestive tract." Histochem J. 27. 420-426 (1995)

[Publications] Nagase Y: "Immunohistochemical Localization of glucose transporters in human renal cell carcinoma." J Urol. 153. 798-801 (1995)

[Publications] Ozawa H: "The granin family-its role in sorting and secretory granule formation." Cell Struct Funct. 20. 415-420 (1995)

[Publications] Inukai K: "Characterization of rat GLUT5 and functional analysis of chimeric proteins of GLUT1 glucose transporter and GLUT5 fructose transporter." Endocrinology. 136. 4850-4857 (1995)

[Publications] Ogihara H.: "Immuno-localization of H^1/peptide cotransporter in rat digestive tract." Biochem Biophys Res Commun. (in press).

[Publications] 高田邦昭(分担): "大食細胞.電子顕微鏡でみるミクロの世界-生物系-" (日本電子顕微鏡学会編)学際企画,東京, 2 (1995)

[Publications] 高田邦昭(分担): "糖の吸収と配分の分子機構にみる,人体の世界" 読売新聞社,東京, 1 (1995)

高田邦昭群馬大学, 生体調節研究所, 教授 (20129290)