1995 Fiscal Year Annual Research Report

血液系免疫系細胞におけるp72_<Syk>の生理及び病理作用の分子機構

Research Project

Project/Area Number	07457043
Research Category	Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
Research Institution	Kobe University
Principal Investigator	山村博平神戸大学, 医学部, 教授 (90030882)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	定清直神戸大学, 医学部, 助手 (10273765) 柳茂神戸大学, 医学部, 助手 (60252003) 南康博神戸大学, 医学部, 助教授 (70229772)
Keywords	チロシンキナーゼ / Syk / K562細胞 / DT40細胞 / コルタクチン / SH2 / TPA
Research Abstract	我々の見い出したチロシンキナーゼ、Syk、は他の非受容体型チロシンキナーゼとは異なり細胞質に存在している。また1次構造上はSrc familyと異なりSH2を2つもちSH3を持たないこと、Src familyを負に制御するC末端のチロシン残基(QYQ配列)がないという特徴を有している。Sykの生理作用並びに病理作用を追及し今年度は以下のことを明らかにした。我々はTPA刺激によって顆粒球や巨核球に分化していくK562細胞を用いてSykのdominat negative mutantを作成しTPA刺激等によるSykの機能を解析した。K562細胞においてはSykは分子量80Kの蛋白質をTPA刺激依存性に活性化する。この80K蛋白質を検討した結果コルタクチンであることを明らかにした。Srcの良い基質でもあるこの蛋白質の燐酸化の意義についてさらに追及している。さらに我々は放射線照射とチロシン燐酸化についてSyk-やLyn-negativeのプロB細胞(DT40細胞)を用いて解析した。たしかに放射線照射はチロシン燐酸化活性を促進アポトーシスをきたすが、必ずしもSykのみがこの反応に関与しているのではないことを見い出した。またSykの活性化とCyclic AMPの関係について多核白血球を用いて調べたところ、fMLPによるSykの活性化にはCyclic AMPは阻害的に作用することを明らかにした。このことはCyclic AMP依存性蛋白質燐酸化酵素に依るSykの燐酸化そして不活性化を強く示唆している。最近Syk familyに所属するチロシンキナーゼZap-70の2つのSH2のチロシン燐酸化残基との結合様式が明らかにされたが、我々はSykそのものの2つのSH2についてその作用の違いについて検討した。Sykの活性化に依るカルシウム動員作用等において双方のSH2が必要であることを明らかにするとともに、C末側のSH2がより重要な役割を果たしていることをDT40細胞を用いて明らかにした。また自己燐酸化部位のチロシン残基を他のアミノ酸に置換するとSykの活性がほとんどなくなることも明らかにした。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] Nagai, K. et. al.: "Tyrosine phosphorylation of Shc is mediated through Lyn and Syk in B cell receptor signaling." J. Biol. Chem.270(12). 6824-6829 (1995)
[Publications] Yanagi, S. et. al.: "The structure and function of p72^<syk> expressed in hematopoietic cells" Cellular Signalling. 7(3). 185-193 (1995)
[Publications] Qin, S. et. al.: "Activation and tyrosine phosphorylation of p72^<syk> as well as calcium mobilization after hydrogen peroxide stimulation in peripheral blood lymphocytes." Biochem. J.308(1). 347-352 (1995)
[Publications] Yamamura, H.: "Syk Spleen tyrosine kinase(vertebrates)" The Protein Kinase Factsbook. 2. 109-111 (1995)
[Publications] Yang, C. et. al.: "Syk and Lyn are involved in radiation-induced signaling, but inactivation of Syk or Lyn alone is not sufficient to prevent radiation-induced apoptosis." J.Biochem.118(1). 33-38 (1995)
[Publications] Asahi, M. et. al.: "Cyclic AMP-elevating agents negatively regulate the activation of p72syk in N-formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine receptor signaling." Biophys. Biochem. Res. Commun.212(3). 887-893 (1995)

1995 Fiscal Year Annual Research Report

血液系免疫系細胞におけるp72_<Syk>の生理及び病理作用の分子機構

Principal Investigator

山村 博平 神戸大学, 医学部, 教授 (90030882)

Research Products

[Publications] Nagai, K. et. al.: "Tyrosine phosphorylation of Shc is mediated through Lyn and Syk in B cell receptor signaling." J. Biol. Chem.270(12). 6824-6829 (1995)

[Publications] Yanagi, S. et. al.: "The structure and function of p72^<syk> expressed in hematopoietic cells" Cellular Signalling. 7(3). 185-193 (1995)

[Publications] Qin, S. et. al.: "Activation and tyrosine phosphorylation of p72^<syk> as well as calcium mobilization after hydrogen peroxide stimulation in peripheral blood lymphocytes." Biochem. J.308(1). 347-352 (1995)

[Publications] Yamamura, H.: "Syk Spleen tyrosine kinase(vertebrates)" The Protein Kinase Factsbook. 2. 109-111 (1995)

[Publications] Yang, C. et. al.: "Syk and Lyn are involved in radiation-induced signaling, but inactivation of Syk or Lyn alone is not sufficient to prevent radiation-induced apoptosis." J.Biochem.118(1). 33-38 (1995)

[Publications] Asahi, M. et. al.: "Cyclic AMP-elevating agents negatively regulate the activation of p72syk in N-formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine receptor signaling." Biophys. Biochem. Res. Commun.212(3). 887-893 (1995)

山村博平神戸大学, 医学部, 教授 (90030882)