下垂体前葉細胞におけるホルモン産生能の特異的発現機構に関する形態学

1996 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07457052
• Research Institution: Tokai University School of Medicine
• Principal Investigator: 長村 義之 東海大学, 医学部, 教授 (10100992)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 竹腰 進 東海大学, 医学部, 助手 (70216878) ; 佐藤 慎吉 東海大学, 医学部, 講師 (80119677) ; 堤 寛 東海大学, 医学部, 助教授 (80138643)
• Keywords: 下垂体前葉細胞 / 転写因子 / 機能発現 / 免疫組織化学 / 遺伝子発現 / ホルモンレセプター / in situ hybridization / Pit-1遺伝子

Research Abstract

これまで我々は下垂体特異的蛋白転写活性因子Pit-1の蛋白および遺伝子発現をラットおよびヒト下垂体・下垂体腺腫において検討し,機能特異性があるとされるisoformであるPit-1 β,Pit-1 Tに特異的なアミノ酸配列に対する抗体を作成し免疫組織化学(IHC)を行った。今年度は特異的なoligo-nucleotide probeを作成してnon-radioisotopic in situ hybridization (ISH)を各種腺腫において検討し,Pit-1βはGH細胞,Pit-1TはTSH細胞により強く発現し,それぞれ機能分化に関与する事を報告した。
さらにエストロジェン・甲状腺ホルモン(T3)・レチノイドなどのレセプターとPit-1の相互作用に注目し,これらのレセプターの局在をIHCおよびISH法を用いて検討した結果,PRL産生腺腫でEsgrogen ReceptorとPit-1の共存を高率で見いだし,またT3,レチノイドと二量体を形成するRetinoid X receptorとPit-1蛋白,mRNAの同一細胞での共存を高感度のCatalyzed signal amplifi-cation法,Combined-ISH-IHC法を用いて確認し,報告した。GHRH-receptor(R)に関しては微量遺伝子を組織切片上でPolymerase chain reaction (PCR)を用いて増幅し検出するin situ PCR法を導入し,GH産生細胞の機能分化・細胞増殖への関与を細胞レベルで証明すべく検討を開始した。GH産生腺腫の動物モデルとされるヒトGHRH transgenic ratの過形成およびGH腺腫おいてGHRHRの強い発現がPit-1蛋白,mRNAとともに認められ,GHRHRとPit-1の共働作用を強く示唆すると考えられた。ヒト下垂体腺腫においても同様の所見を得ており,その一部を報告した。

Research Products

• [Publications] Sanno N.,Osamura R.Y.et.al.: "Combined Non-isotopic in situ hybridization method and indirect immunohisto-chemical analysis of hormone production in rat pituitary." J Clin Pathol : Mol Pathol. 49. M57-M60 (1996)
• [Publications] Sanno N.,Osamura R.Y.Pituitary Adenomas.: "In situ Hybridizaytion Analysis of Pit-1 mRNA and Hormonal Production in Human Pituitary Adenomas." Acta Neuropathol. 91. 263-268 (1996)
• [Publications] Sanno N.,Osamura R.Y.et.al.: "Expressiion of Pit-1 and Estrogen Receptor Messenger Ribonucleic Acids in Prolactin Producing Pituitary Adenomas." Modern Pathology. 9. 529-533 (1996)
• [Publications] Sanno N.,Osamura R.Y.et.al.: "Application of CSA in immunodetection of gonadotropin subunits in clinically funcationing pituitary adenomas." Am J Clin Pathol. 106. 16-21 (1996)
• [Publications] Matsuno A,,Osamura RY et.al.: "A case of pituitary somatotroph adenoma with concomitant secretion of growth hormone,prolactin,and adarenocorticotropic hormone" Acta Neurochir. (in press).
• [Publications] Sanno N.,Osamura R.Y.et.al.: "Clinical and cytofunctional classification of pituitary adenomas." Acta Neurochirurgica. 138. 1186-1192 (1996)