1996 Fiscal Year Annual Research Report
肝癌の進展過程における活性酸素消去酵素 GSH-PX遺伝子の発現低下機序とその意義
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07457065
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
守内 哲也 北海道大学, 医学部, 教授 (20174394)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
浜田 淳一 北海道大学, 医学部, 講師 (50192703)
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| Keywords | LECラット / 活性酸素 / グルタチオン・ベルオキシダーゼ / p53 |
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| Research Abstract |
肝癌の自然発症モデルであるLECラットでは、細胞型グルタチオン・ペルオキシダーゼ(GSH-Px)の発現が先天的に低下している。我々はp53ノックアウトマウスでもLECラットと同様にGSH-Px活性が約30-40%肝臓でのみ低下していることを見出した。本年度は1)GSH-Pxの発現とp53との関連と2)GSH-Pxの発現低下とLECラットの肝炎・肝癌発生との関連について研究した。GSH-Px遺伝子の5'上流域2kbのdeletion mutantsを作製し、これらのDNA断片をルシフェラーゼ遺伝子に連結した。そして野生型および変異型p53cDNAをラット肝癌細胞で過剰発現させてGSH-Pxプロモーターのルシフェラーゼアッセイを行った。その結果、野生型および変異型p53の両方で同等のルシフェラーゼ活性の上昇が認められた。この結果から、p53のN-末端にあるactivation domainがGSH-Pxの発現を促進していることが示唆された。GSH-Px活性は飼料中に含まれるセレニウム濃度によっコントロールすることができるので、セレニウム欠乏食飼育群(GSH-Px活性低下群)と補充群のLECラット(対照群)で、肝炎と肝癌の発生率を調べる実験を行った。その結果、意外なことにセレニウム欠乏食飼育LECラットの方が補充群のLECラットに比べて有意に肝炎の発生が遅延した。肝癌の発生に関しては、実験開始後まだ1年6カ月経過していないため経過観察中であるが、ER-1細胞でのin vitroの実験からセレニウム欠乏食飼育LECラットでは発癌を促進されると予測される。ラットの乳癌細胞ER-1は自然退縮型腫瘍であるが、増殖因子EGFを一ケ月間in vitroで作用せせると悪性化して宿主を殺すまで増殖を続ける。しかし、この細胞にEGFと共にセレニウムを添加して培養すると細胞内の過酸化水素の産生が抑制され、悪性化も起こさないことが見出された。またヒドロキシルラジカルでDNAが修飾されて生じる8-ヒドロキシグアニン量も抑制された。
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[Publications] 守内 哲也: "Plasma glutathione peroxidase deficiency caused by renal dysfunction" Nephron. 73. 207-211 (1996)
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[Publications] 守内 哲也: "Cloning, seqnecing, and chromosomal localization of two tandemly arranged human pseudogenes for the proliferating cell nuclear antigen" Mamm. Genome. 7. 906-908 (1996)
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[Publications] 守内 哲也: "Possible roles of an adult T cell leukemia-derived factor (ADF) /thioredoxin in drug resistance of adult T cell leukemia (ATL) to Adriamycin" Blood. (印刷中).
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[Publications] 守内 哲也: "Selenium deficiency does not promote acute hepatitis in Long-Evans Cinnamon (LEC) rats." J. Trace Elem. Exp. Med.(印刷中).
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[Publications] 浜田 淳一: "Hepatocyte growth factor and c-met expression in Long-Evans Cinnamon rats with spontaneous hepatitis and hepatoma." Hepatology. 24 (3). 596-602 (1996)
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[Publications] 岡田 太: "Transforming growth factor beta 1 (TGF-betal) produced in tumor tissue after chemotherapy acts as a lymphokine-activated killer attractant." Br. J. Cancer. 74. 274-279 (1996)
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[Publications] 浜田 淳一: "分子腫瘍学" 中外医学社, 17 (1996)
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[Publications] 守内 哲也: "新病理学総論" 南山堂(印刷中), 15
