1996 Fiscal Year Annual Research Report

α1-6フコース転移酵素のクローニングと肝細胞癌早期診断への応用

Research Project

Project/Area Number	07457132
Research Institution	NIIGATA UNIVERSITY
Principal Investigator	青柳豊新潟大学, 医学部, 助教授 (00142266)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	鈴木康史新潟大学, 医学部, 助手 (50270939) 小方則夫新潟大学, 医学部付属病院, 助手 (70204063) 小谷昌司新潟大学, 理学部, 教授 (60018702)
Keywords	フコース転移酵素 / 肝細胞癌 / 糖鎖変異 / 早期診断 / アルファフェトプロティン
Research Abstract	申請者らは近年増加傾向にある肝細胞癌(HCC)の早期診断を目標に,申請者らが今までに明らかにしてきた血清複合型糖蛋白の癌化にともなうフコシル化に関与するα1-6フコース転移酵素(AFT)の測定,精製とその遺伝子クローニングを計画し実行してきた。本プロジェクトにおいては,一番の問題点として,AFTの再現性の良い活性測定法の開発が必要と考えられた。この点に関し,申請者らはヒト血清由来トランスフェリンの糖鎖よりプロナーゼ消化を用いAsn結合糖鎖を得,その構造に2アミノピリジンを含む活性エステルであるPNSNBを用い蛍光標識とした。本物質を基質として,HCC組織ゴルジ分画のAFT活性を逆相系高速液体クロマトを用い定量的に測定することが可能となった。本活性測定計を用い,AFTのプロダクトであるレンズマメレクチン結合性画分の多いHCC症例,HepG2培養細胞系ならびにアルファフェトプロテイン産生性腎細胞癌症例より得られた癌部組織,培養上清および血清より各種クロマトを用い純化精製中に,Taniguchi N,Uozumi Nらによりporcine brainより同種の酵素の純化,クローニングが報告された(J Biol Chem 271:27810-7,1996)。その報告によると,アミノ酸575個よりなる蛋白でtype II transmembrane糖転移酵素と考えられ,C末端付近にcatalytic domainの存在が確認された。そのため,ヒト由来AFTとのホモロジーを考慮し,同部のプライマーを設定しHepG2培養細胞を材料としてPCRによるmRNAの検出を試みたところ,効率よく検出されたため,ヒトcDNAライブラリーより現在クローニングの作業を進行中である。

Research Products
(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] 青柳豊: "Carbohydrate-based measurement on alpha-fetoprotein in the early diagnosis of hepatocellular carcinoma,Mini-Review." Glycoconjugate Journal. 12. 194-199 (1995)
[Publications] 鈴木康史: "Microheterogeneity analysis of serum transferrin before and after therapies to hepatocelluar carcinoma." Int.Hepatol.Commun.4. 190-194 (1995)
[Publications] 青柳豊: "Alpha-fetoprotein producing renal cell carcinoma with the increased activity of N-acetylglucosaminyltransferase III." Nephron. 74. 409-414 (1996)
[Publications] 青柳豊: "Clinical significance of simultaneous determinations of α-fetoprotein and des-γ-carboxy prothrombin in monitoring recurrence of patients with hepatocellular carcinoma." Cancer. 77. 1781-1786 (1996)
[Publications] 鈴木康史: "Microheterogeneity of serum transferrin in the diagnosis of hepatocelluar carcinoma." J Gastroenterol Hepatol.11. 358-365 (1996)
[Publications] 土田和孝: "Isolation of nobel collagen-binding protein from the mushroom,Hypsizigus marmoreus which inhibits the Lewis lung carcinoma cell adhesion to type IV collagen." J Biol Chem. 270. 1481-1484 (1995)
[Publications] 青柳豊: "消化器病Up to date,Consensus and Controversies,1996" 編集代表:小林絢三,永井書店, 396 (1997)
[Publications] 青柳豊: "Methods in Molecular Medicine,Lectin Methods and Protocols" Rhodes,JM&Hilton JD,Humana Press Inc(in press), (1997)

1996 Fiscal Year Annual Research Report

α1-6フコース転移酵素のクローニングと肝細胞癌早期診断への応用

Principal Investigator

青柳 豊 新潟大学, 医学部, 助教授 (00142266)

Research Products

[Publications] 青柳豊: "Carbohydrate-based measurement on alpha-fetoprotein in the early diagnosis of hepatocellular carcinoma,Mini-Review." Glycoconjugate Journal. 12. 194-199 (1995)

[Publications] 鈴木康史: "Microheterogeneity analysis of serum transferrin before and after therapies to hepatocelluar carcinoma." Int.Hepatol.Commun.4. 190-194 (1995)

[Publications] 青柳豊: "Alpha-fetoprotein producing renal cell carcinoma with the increased activity of N-acetylglucosaminyltransferase III." Nephron. 74. 409-414 (1996)

[Publications] 青柳豊: "Clinical significance of simultaneous determinations of α-fetoprotein and des-γ-carboxy prothrombin in monitoring recurrence of patients with hepatocellular carcinoma." Cancer. 77. 1781-1786 (1996)

[Publications] 鈴木康史: "Microheterogeneity of serum transferrin in the diagnosis of hepatocelluar carcinoma." J Gastroenterol Hepatol.11. 358-365 (1996)

[Publications] 土田和孝: "Isolation of nobel collagen-binding protein from the mushroom,Hypsizigus marmoreus which inhibits the Lewis lung carcinoma cell adhesion to type IV collagen." J Biol Chem. 270. 1481-1484 (1995)

[Publications] 青柳豊: "消化器病Up to date,Consensus and Controversies,1996" 編集代表:小林絢三,永井書店, 396 (1997)

[Publications] 青柳豊: "Methods in Molecular Medicine,Lectin Methods and Protocols" Rhodes,JM&Hilton JD,Humana Press Inc(in press), (1997)

青柳豊新潟大学, 医学部, 助教授 (00142266)