1996 Fiscal Year Annual Research Report
3次元組織培養法を用いた消化管粘膜の増殖と分化と癌化に関する研究 -消化管粘膜で上皮間質間相互作用に関与する因子の同定-
| Project/Area Number |
07457134
|
|---|
| Research Institution | Osaka University |
|---|
Principal Investigator |
川野 淳 大阪大学, 医学部, 助教授 (60133138)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
竹井 謙之 大阪大学, 医学部・附属病院, 医員
辻 晋吾 大阪大学, 医学部・附属病院, 医員
永野 公一 大阪大学, 医学部, 助手 (60237542)
|
|---|
| Keywords | 消化管粘膜 / 増殖 / 分化 / 癌化 / 3次元培養 / 上皮間質相互作用 / 増殖因子 |
|---|
| Research Abstract |
1)3次元培養による消化管粘膜組織培養モデルの開発 コラーゲンゲルを応用した3次元培養システムで様々の上皮細胞と線維芽細胞の間に存在する相互作用について検討を行った。その結果、線維芽細胞は一般に上皮細胞の生存を促進したが、上皮細胞には線維芽細胞の生存や形態変化を促進する(FDF活性)ものとしないものが認められた。後者の性質を持つ上皮細胞にはトランスフォームしたものが多く、細胞が癌化するにつれてFDF活性を失って組織の構築や機能を喪失していく過程が推測された。
2)線維芽細胞増殖分化促進因子(FDF)の精製 RGM-1細胞によって産生されるFDF活性には肝臓の伊東細胞の生存や細胞突起の形成を促進し、神経細胞(PC-12)の神経突起の伸張を促すなど、多彩な生物学的作用が存在した。このFDF活性の精製を行うため、RGM-1細胞の大量培養を行い30Lの無血清培養上清を得た。塩析操作にて濃縮した培養上清を出発材料にして各種カラムを装着したFPLCシステムで精製を行った。最終精製物をSDSポリアクリルアミドで電気泳動にかけ、銀染色を行ったところ数本のバンドが確認され、そのうち30kDaに位置する蛋白がFDF活性をもつことが判明した。そのN末端アミノ酸配列は既知の蛋白質とは相同性がなかったので、現在これをもとにして作成したDNAプローブを用いて遺伝子クローニングを行っている。
|
-
[Publications] Sasayama K.et al: "Kelationship between interleukin-8 and myeloperoxidase activity in human gastric mucosa." J Gastroenterol Hepatol. 12. 104-108 (1997)
-
[Publications] Tsuji S,et al: "Helicobacter pylori extract stimulates inflammatory nitric oxide prodaction." Cancer Letters. 108. 195-200 (1996)
-
[Publications] Kawano S,et al: "Gastric mucosal energy metabolism and intracellular mucin content changes in patients with liver cirhosis." J Gastroenterol Hepatol. 11. 380-384 (1996)
-
[Publications] Kobayashi I,et al: "R.GM-1,a cell line derived from normal gastric mucosa of rat." In Vitro Cell Dev Biol-Animal. 32. 259-261 (1996)
-
[Publications] Nishimura Y,et al: "The F(ab)_2 fragment of an anti-ICAM-1 monoclonal antibody attenuates liver injury after orttcotopic liver transplantation" Transplantatin. 11. 99-104 (1996)
-
[Publications] Masuda E,et al: "Endogeneous nitric oxide modulatel ethanol-induced gastric mucosal injury in rats." Gastroenterology. 108. 58-64 (1995)
