神経筋接合部疾患におけるイオンチャネルとレセプターの分子病態に関する免疫学的研究

1997 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07457154
• Research Institution: Kanazawa University
• Principal Investigator: 高守 正治 金沢大学, 医学部・神経内科学講座, 教授 (60039815)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 坂尻 顕一 金沢大学, 医学部・付属病院・神経内科, 助手 (00283127) ; 吉川 弘明 金沢大学, 医学部・付属病院・神経内科, 助手 (10272981) ; 駒井 清暢 金沢大学, 医学部・付属病院・神経内科, 助手 (90283126) ; 新田 永俊 金沢大学, 医学部・神経内科学講座, 講師 (50251947)
• Keywords: Lambert-Eaton筋無力症候群 / 重症筋無力症 / カルシウムチャネル / アセチルコリン / リアノジン受容体 / シナプトタグミン / 自己免疫

Research Abstract

1.Lambert-Eaton筋無力症候群-前年度までに,本病抗体の主たる抗原決定基として特定したP/Q型電位依存性カルシウムチャネル(VGCC)α1サブユニットについて,その分子構造の中で,Ca^<2+>選別・透過機能,リガンド結合能を担うS5-S6 linker領域を選び,そのペプチドを合成し,抗原として動物を免疫,疾患誘導の可否を検討した。(1)ドメインII S5-S6 linkerペプチドに担体蛋白質としてKLHを結合させ,ルイスラット10匹を免疫した結果,全例にω-コノトキシンMVIICラベル小脳組織抽出物(P/Q型VGCC)と反応する抗ペプチド抗体産生をみ,このうち4匹で,神経筋標本の微小電極による電気生理学的分析の結果,終板電位振幅を指標として算出したアセチルコリン量子性遊離量低下によって,疾患モデルの成立を証明した。(2)VGCCα1サブユニットを構成する4個のドメインの中,Ca^<2+>選別・透過能,リガンド結合能などのチャネル機能が最も高いのはドメインIIIである。そこでこのドメインIII S5-S6 linker領域の合成ペプチドを用い,ドメインIIの場合と同様の動物免疫実験を行った被免疫10匹全例にP/Q型型VGCCと反応する抗ペプチド抗体産生をみるとともに,10匹中6匹で,ドメインIIの場合に用いたと同じ電気生理学的指標により,疾患モデル成立が証明された。
2.重症筋無力症-重症筋無力症本来,抗アセチルコリン受容体抗体が主役を演じるシナプス伝達異常疾患であるが,胸腺腫を伴う本病では,加えて筋収縮疲労の病態が併存する。そこで胸腺腫と筋収縮疲労の関係を示唆する動物モデルとしてBuffalo/Mnaラットをとりあげ検討し以下の結果を得た。(1)ヒト良性胸腺腫類似の組織像,(2)ペプチド抗体によりこの胸腺にリアノジン受容体発現を証明,(3)この受容体は上皮細胞上に発現,(4)血中に抗リアノジン受容対抗体を証明,(5)神経筋標本は正常なシナプス伝達機能を示す一方,筋収縮張力著明低下をみた。

Research Products

• [Publications] Takamori M, Iwasa K, Komai K: "Antibodies to synthetic pepitides of the α1A subunit of the voltage-gated calcium channel in Lambert-Eaton myasthenic symdrome" Neurology. 48,5. 1261-1265 (1997)
• [Publications] Furui E, Fukushima K, Sakashita T, Sakato S, Matsubara M, Takamori M: "Fanilial limb-girdle myasthenia with tububar aggregates" Muscle and Nerve. 20.5. 599-603 (1997)
• [Publications] Yoshikawa A, Iwasa K, Sato K, Takamori M: "FK506 prevents induction of rat experimental autoimmune myashevia gravis" J.Autoimmunity. 10. 11-16 (1997)
• [Publications] Takamori M, Iwasa K, Komai K: "Antigenic sites of the voltage-gatad calcium channel in Lambert-Eaton myasthenic syndrome" Am.New York Acad.Sci.(印刷中). (1998)
• [Publications] Kojima H, Abiru Y, Sakajiri K, Watabe K, Ohishi N, Takamori M, Hatanaka H, Yagi K.: "Adenovirus-mediated transduction with human glial cell line-deived neurotrophic factor gene prevents 1-m-4p-1,2,3,6-t-induced dopamine depletion in striatum of mouse brain" Biochem.Biophys.Res.Commu.238. 569-573 (1997)
• [Publications] Yoshikawa H, Satoh K, Iwasa K, Takamori M: "In vitro production of autiacexylcho line veceptor antibody and IgG by periphenal blood lymphocytes of patients ierth myasthenid gravis" Ann.New York Acad.Sci.(印刷中). (1998)
• [Publications] 高守 正治: "神経筋接合部の分子構造と免疫" 神経研究の進歩. 41・2. 253-267 (1997)
• [Publications] 高守 正治: "分子生物学と神経生理学の接点-神経筋接合部におけるレセプターとイオンチャネル病を中心として" 脳波と筋電図. 25・3. 229-242 (1997)
• [Publications] 高守 正治: "がんと神経障害-Lambert-Eaton筋無力症候群" Clinical Neuroscience. 15・8. 903-907 (1997)
• [Publications] 高守正治、岩佐和夫、駒井清暢、安川善博: "イオンチャネルと神経疾患-Lambert-Eaton筋無力症候群と重症筋無力症" 脳と神経. 49・12. 1089-1100 (1997)
• [Publications] 高守正治: "神経筋接合部疾患に対する生化学的アプローチ" 臨床神経学. 36・12. 1363-1364 (1997)
• [Publications] 高守正治: "分子免疫からみた電位依存性カルシウムチャネル-Lambert-Eaton筋無力症候群を中心として" 精神神経薬理. (印刷中). (1998)
• [Publications] 高守正治: "神経筋接合部疾患研究における分子生物学と分子免疫学の接点" 日本臨床-分子筋肉病学. 55・12. 3106-3113 (1997)
• [Publications] 高守正治、駒井清暢、岩佐和夫、吉川弘明: "アセチルコソン受容体の分子生物学と重症筋無力症の分子免疫学的研究" 日本臨床-分子筋肉病学. 55・12. 3315-3321 (1997)
• [Publications] 岩佐和夫、駒井清暢、安川善博、丸田高宏、高守正治: "電位依存性カルシウムチャネル(VGCC)の分子構造、機能とLambert-Eaton筋無力症候群(LEMS)の分子免疫学" 日本臨床-分子筋肉病学. 55・12. 3322-3330 (1997)
• [Publications] 高守正治、犬塚貴、中村龍文: "本邦における傍腫瘍性神経症候群のアンケートによる実態調査" 臨床神経学. 37・2. 93-98 (1997)
• [Publications] 高守正治: "重症筋無力症" ブレイン・ナーシング. 13・2. 165-172 (1997)
• [Publications] 吉川弘明、佐藤勝明、高守正治: "医学と医療の最前線-重症筋無力症治療方針" 日本内科学会誌. 86・5. 849-855 (1997)
• [Publications] 佐藤勝明、吉川弘明、高守正治: "エビデンスに基づく内科疾患の治療戦略-重症筋無力症" 内科. 79・6. 1494-1504 (1997)
• [Publications] 高守 正治: "Lambert-Eaton筋無力症候群" 蛋白質 核酸 酵素. (印刷中). (1998)
• [Publications] 岩佐和夫、浅賀知也、高守正治: "重症筋無力症の病因における抗リアノジン受容体抗体と胸腺" 日本内科学会誌. (印刷中). (1998)
• [Publications] 駒井清暢、岩佐和夫、高守正治: "Lambert-Eaton筋無力症候群-カルシウムチャネル分子構造と免疫" 日本内科学会誌. (印刷中). (1998)
• [Publications] Yoshikawa H, LambertEH, Walser-KuntzDR, Yasukawa Y, McComick RJ.: "A 17-mer self-peptide of acetylcholine receptor binds to B cell MHC class II,activates nelper T cells,and stimulates autoantibody production and electrophysiologic signs of myasthen gravis." J.Immunol.159. 1570-1577 (1997)
• [Publications] Yoshikawa H, Lennon VA: "Acetylcholine receptor autoantibody secretion by thymocytes : Relationship to myasthenia gravis." Neuralogy. 49. 562-567 (1997)
• [Publications] Iwasa K: "Striational autoantibodies in myasthenia gravis mainly react with ryanodine receptor" Muscle Nerve. 20. 753-756 (1997)
• [Publications] 高守 正治: "重症筋無力症-アセチルコリン受容体" 現代医療. 30. 306-310 (1998)
• [Publications] 高守正治: "Lambert-Eaton筋無力症候群におけるカルシウムチャネルおよび周辺機構の分子構造と病態 In:ミオパチー-臨床から分子遺伝子まで" 医歯薬出版, 7 (1997)
• [Publications] 高守正治: "重症筋無力症,ランバードイ-トン筋無力症候群,In:臨床免疫学" 朝倉書店, 9 (1997)
• [Publications] 高守正治: "Lambert-Eaton筋無力症候群 In:最新脳と神経科学シリーズ第9巻「腫瘍性病変の神経科学」" メジカルビュー社(印刷中), (1998)
• [Publications] 高守正治: "重症筋無力症 In:神経伝達物質update" 中外医学社(印刷中), (1998)
• [Publications] 高守正治: "重症筋無力症、多発筋炎、周期性四肢麻酔 In:新臨床内科学第7報" 医学書院, 7 (1997)
• [Publications] 高守正治: "重症筋無力症 In:自己免疫でおこる難治性疾患" 医薬ジャーナル社(印刷中), (1998)
• [Publications] 高守正治: "重症筋無力症 In:内科治療ガイド" 文光堂, 6 (1997)
• [Publications] 高守正治: "アセチルコリン遊離機構の分子病態と免疫 In:アセチルコリン最新の課題" Excerpta Medica Inc.(印刷中), (1998)