分子生物学的手法による妊娠中毒症特異因子の同定とその病態との関連に関する研究

1996 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07457384
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• Research Institution: Nagoya University
• Principal Investigator: 倉内 修 名古屋大学, 医学部, 講師 (80195528)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 水谷 栄彦 名古屋大学, 医学部, 助教授 (00159162) ; 村田 善晴 名古屋大学, 環境医学研究所, 助教授 (80174308) ; 板倉 敦夫 名古屋大学, 医学部, 助手 (70262897)
• Keywords: 妊娠中毒症 / 特異遺伝子 / 胎盤 / 肝細胞増殖因子

Research Abstract

正常胎盤2例と妊娠中毒症胎盤2例よりm-RNAを抽出しreverse transcriptaseでc-DNAに変換した。次に2種類のランダムプライマーを組み合わせたDifferential PCR法により正常胎盤及び中毒症胎盤において発現しているm-RNA由来のDNAをアイソトープ存在下に増幅したのち電気泳動、オートラジオグラフィーを施行し、両者間のバンドの相違を調べた。その結果妊娠中毒症のみに見られたバンド2個(T1、T2)と正常胎盤のみ見られたバンド2個(N1、N2)が得られた。T1、T2をプローブとして正常胎盤(2例)及び中毒症胎盤(2例)より抽出したm-RNAを用いてNothern blottingを行い、この遺伝子が中毒症胎盤においてのみ発現していることの確認を試みたが、正常胎盤、中毒症胎盤ともにバンドは認められなかった。この原因としては、切り出したバンド(T1、T2)のサイズが約100kbと短かったことが考えられる。今後さらに同様の実験を継続していく予定である。また、妊娠中毒症胎盤において肝細胞増殖因子(HGF)遺伝子の発現を検討したところ特異的に低下していた。そこでHGF蛋白量を測定したところ正常胎盤では6.16±3.32ng/mg of protein、妊娠中毒症胎盤では4.19±1.41ng/mg of proteinと明らかに妊娠中毒症胎盤出低値を示した。またin situ hybridization法によりHGFは胎盤の間質細胞に発現していることが明らかとなった。今後はHGFがどのように妊娠中毒症に関わっているかを検討していく予定である。