1996 Fiscal Year Annual Research Report

神経芽細胞腫におけるアポトーシス・エンドヌクレアーゼの分子生物学的研究

Research Project

Project/Area Number	07457419
Research Institution	UNIVERSITY OF TOKYO
Principal Investigator	横森欣司東京大学, 医学部附属病院, 助教授 (20251291)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	田沼靖一東京理科大学, 薬学部, 教授 (10142449) 尾花和子東京大学, 医学部附属病院, 助手 (60272580) 上井義之東京大学, 医学部附属病院, 助手 (70177567) 土田嘉昭東京大学, 医学部附属病院, 教授 (80010164)
Keywords	神経芽細胞腫 / アポトーシス / エンドヌクレアーゼ / DNA断片化
Research Abstract	昨年の研究で神経芽細胞腫(以下本症と略す)培養細胞株16種を入手し、アポトーシス誘導剤(アクチノマイシンD、アドリアマイシン、カンプトテシン)によるアポトーシス発現を検討した。その結果、本症培養細胞株は、アポトーシスのDNA断片化の観点より、大断片化すら誘発されない株、大断片化のみ起こる株、およびヌクレオソーム単位でのDNA断片化による典型的なladder structureを示す小断片化まで誘発される株の3種類に分類することが出来た。本年度はDNA大断片化を司るDNaseλに関して、本症培養細胞株TGW株(DNaseλ活性陽性)とGOTO株(同酵素活性陰性)を用いて比較検討することによって本酵素の同定研究を進めた。TGW株の細胞核を用いたautodigestionの系においてDNA大断片化のin vitroでの再現を目指したところ、約20kbのDNA断片の生成が確認され、細胞レベルで観察されるDNA大断片化がin vitroで再現できることが確認された。このautodigestionの系を用いて、DNA断片化を示さないGOTO株およびヌクレオソーム単位でのDNA断片化を示すSK-N-SH株について、in vitroにおけるDNA断片化の再現を検討した。その結果、いずれの株においても細胞レベルで観察されるDNAの状態が再現された。また、ヌクレオソーム単位でのDNA断片化を司るDNaseとしてDNaseγが報告されているが、本症培養細胞株の代表的な3株(TGW株、GOTO株、SK-N-SH株)におけるDNaseγの遺伝子解析を目的としたサザン、ノーザンブロッティング解析のために、各培養細胞株を凍結した。

Research Products

(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] Sei-ichi Tanuma: "Molecular mechanisms of apoptosis." Apoptosis in Normal Development and Cancer (ed.by Mels Sluyser),Taylor & Francis. 39-59 (1996)
[Publications] Sei-ichi Tanuma: "Inhibitory effect of tannic acid on human immunodeficiency virus promoter activity induced by 12-0-tetradecanoylphorbol-13-acetate in Jurkat T-cells." Biochem.Biophys.Res.Commun.220. 411-417 (1996)
[Publications] Sei-ichi Tanuma: "DNA fragmentation during thymic apoptosis is catalyzed by DNase γ." Apoptosis. 1. 147-152 (1996)
[Publications] Sei-ichi Tanuma: "Properties of poly(ADP-ribose)glycohydrolase purified from pig testis nuclei." Arch.Biochem.Biophys.336. 139-146 (1996)
[Publications] Sei-ichi Tanuma: "Replication factor C recognizes 5′-phosphate ends of telomeres." Biochem.Biophys.Res.Commun.229. 310-315 (1996)
[Publications] Sei-ichi Tanuma: "Restrictive proteolysis of fodrin to 120 kDa fragment is not catalyzed by calpain during thymic apoptosis." Apoptosis. 2. 1-7 (1997)
[Publications] 田沼靖一: "アポトーシスとは何か-死からはじまる生の科学-" 講談社, 239 (1996)
[Publications] 田沼靖一: "アポトーシと創薬" ファルマシア, 140 (1996)

1996 Fiscal Year Annual Research Report

神経芽細胞腫におけるアポトーシス・エンドヌクレアーゼの分子生物学的研究

Principal Investigator

横森 欣司 東京大学, 医学部附属病院, 助教授 (20251291)

Research Products

[Publications] Sei-ichi Tanuma: "Molecular mechanisms of apoptosis." Apoptosis in Normal Development and Cancer (ed.by Mels Sluyser),Taylor & Francis. 39-59 (1996)

[Publications] Sei-ichi Tanuma: "Inhibitory effect of tannic acid on human immunodeficiency virus promoter activity induced by 12-0-tetradecanoylphorbol-13-acetate in Jurkat T-cells." Biochem.Biophys.Res.Commun.220. 411-417 (1996)

[Publications] Sei-ichi Tanuma: "DNA fragmentation during thymic apoptosis is catalyzed by DNase γ." Apoptosis. 1. 147-152 (1996)

[Publications] Sei-ichi Tanuma: "Properties of poly(ADP-ribose)glycohydrolase purified from pig testis nuclei." Arch.Biochem.Biophys.336. 139-146 (1996)

[Publications] Sei-ichi Tanuma: "Replication factor C recognizes 5′-phosphate ends of telomeres." Biochem.Biophys.Res.Commun.229. 310-315 (1996)

[Publications] Sei-ichi Tanuma: "Restrictive proteolysis of fodrin to 120 kDa fragment is not catalyzed by calpain during thymic apoptosis." Apoptosis. 2. 1-7 (1997)

[Publications] 田沼 靖一: "アポトーシスとは何か-死からはじまる生の科学-" 講談社, 239 (1996)

[Publications] 田沼 靖一: "アポトーシと創薬" ファルマシア, 140 (1996)

横森欣司東京大学, 医学部附属病院, 助教授 (20251291)

[Publications] 田沼靖一: "アポトーシスとは何か-死からはじまる生の科学-" 講談社, 239 (1996)

[Publications] 田沼靖一: "アポトーシと創薬" ファルマシア, 140 (1996)