1995 Fiscal Year Annual Research Report

新しい免疫抑制物質ISP-1を用いた細胞増殖シグナル伝達機構の解析

Research Project

Project/Area Number	07457537
Research Category	Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
Research Institution	Kyoto University
Principal Investigator	川嵜敏祐京都大学, 薬学部, 教授 (50025706)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	小堤保則京都大学, 薬学部, 助教授 (70205425)
Keywords	ISP-1 / 免疫抑制 / スフィンゴシン / セラミド / アポトーシス / 細胞増殖 / DNAラダー
Research Abstract	これまでの研究により、ISP-1はスフィンゴシン生合成の最初の反応であるセリンパルミトイルトランスフェラーゼを特異的にしかも高い親和性をもって阻害し、その結果、細胞内スフィンゴ脂質、とくにスフィンゴシンやセラミドなどのいわばスフィンゴ糖脂質合成経路の中間代謝物の量が著しく減少することを見出している。これらの事実はスフィンゴシンなどの細胞内レベルが細胞増殖速度を調節している可能性を示している。そこでまず、ISP-1処理細胞および未処理細胞についてFACSにより細胞周期を調べてみた。ところがここで意外にもISP-1処理細胞ではいわゆるアポトーシスと呼ばれる細胞死に特徴的な核の断片化に見られるパターンが観測された。このことは更に、核よりDNAを精製しこれをアガロース電機泳動にかけたところアポトーシスに特徴的なラダーへの分解が観察されること、また、組織化学的核染色によっても核の断片化が観測されたことにより確認された。すなわち、ISP-1処理による細胞増殖抑制は実は個々の細胞の増殖速度、細胞分裂速度が低下したために生じたのではなく、細胞死が亢進したために生じたことを示している。このISP-1により引き起こされるアポトーシスはスフィンゴシン、スフィンゴシンーリン酸を外から適当量添加することにより回復した。しかし一方、多量のスフィンゴシンを加えると細胞は逆にアポトーシスを起こすことも観測された。これらの結果は従来知られていなかった新しい細胞増殖調節機構を明らかにしたものであり、これらスフィンゴシン誘導体が細胞の中で細胞の生死を調節制御する重要なシグナルとなっていることを示している。

Research Products

(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Y. Miyake, Y. Kozutsumi, S. Nakamura, T. Fujita et al.: "Serine palmitoyltransferase is the primary target of a sphingosine-like immunosuppressant, ISP-1/Myriocin." Biochem. Biophys. Res. Commun.211(2). 396-403 (1995)
[Publications] S. Yamada, M. Oyama, H. Kinugasa, T. Nakagawa et al.: "The sulphated carbohydrate-protein linkage region isolated from chondroitin4-sulphate chains of inter-a-trypsin inhibitor in human plasma." Glycobiology. 5(3). 335-341 (1995)
[Publications] K. Ozaki, Reiko T. Lee, Yuan C. Lee & T. Kawasaki: "The difference in structural specificity for recognition and binding between asialoglycoprotein receptors of liver and macrophages." Glycoconjugate J,. 12. 268-274 (1995)
[Publications] Y. Yokota, T. Arai & T. Kawasaki: "Oligomeric structures recquired for complement activation of serum mannan-binding proteins." J. Biochem.117(2). 414-419 (1995)
[Publications] T. Kawano, S. Koyama, H. Takematsu, Y. Kozutsumi et al.: "Molecular cloning of cytidine monophospho-N-acetylneuraminic acid hydroxylase." J. Biol. Chem.270(27). 16458-16463 (1995)
[Publications] H. Takematsu, Y. Kozutsumi, A. Suzuki & T. Kawasaki: "Isolation and Characterization of the rabbit cytochrome b5 gene." DNA Sequence. 6(2). 123-125 (1996)
[Publications] 稲田祐二、川嵜敏祐編: "糖鎖ハイブリット" 共立出版, 269 (1995)

1995 Fiscal Year Annual Research Report

新しい免疫抑制物質ISP-1を用いた細胞増殖シグナル伝達機構の解析

Principal Investigator

川嵜 敏祐 京都大学, 薬学部, 教授 (50025706)

Research Products

[Publications] Y. Miyake, Y. Kozutsumi, S. Nakamura, T. Fujita et al.: "Serine palmitoyltransferase is the primary target of a sphingosine-like immunosuppressant, ISP-1/Myriocin." Biochem. Biophys. Res. Commun.211(2). 396-403 (1995)

[Publications] S. Yamada, M. Oyama, H. Kinugasa, T. Nakagawa et al.: "The sulphated carbohydrate-protein linkage region isolated from chondroitin4-sulphate chains of inter-a-trypsin inhibitor in human plasma." Glycobiology. 5(3). 335-341 (1995)

[Publications] K. Ozaki, Reiko T. Lee, Yuan C. Lee & T. Kawasaki: "The difference in structural specificity for recognition and binding between asialoglycoprotein receptors of liver and macrophages." Glycoconjugate J,. 12. 268-274 (1995)

[Publications] Y. Yokota, T. Arai & T. Kawasaki: "Oligomeric structures recquired for complement activation of serum mannan-binding proteins." J. Biochem.117(2). 414-419 (1995)

[Publications] T. Kawano, S. Koyama, H. Takematsu, Y. Kozutsumi et al.: "Molecular cloning of cytidine monophospho-N-acetylneuraminic acid hydroxylase." J. Biol. Chem.270(27). 16458-16463 (1995)

[Publications] H. Takematsu, Y. Kozutsumi, A. Suzuki & T. Kawasaki: "Isolation and Characterization of the rabbit cytochrome b5 gene." DNA Sequence. 6(2). 123-125 (1996)

[Publications] 稲田祐二、川嵜敏祐 編: "糖鎖ハイブリット" 共立出版, 269 (1995)

川嵜敏祐京都大学, 薬学部, 教授 (50025706)

[Publications] 稲田祐二、川嵜敏祐編: "糖鎖ハイブリット" 共立出版, 269 (1995)