1997 Fiscal Year Annual Research Report

生体膜リン脂質の細胞内輸送とミクロドメインでの機能発現に関する遺伝生化学的研究

Research Project

Project/Area Number	07457545
Research Institution	National Institute of Infectious Diseases
Principal Investigator	西島正弘国立感染症研究所, 細胞化学部, 部長 (60072956)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	川崎清史国立感染症研究所, 細胞化学部, 研究員 (60270641) 齊藤恭子国立感染症研究所, 細胞化学部, 研究員 (70235034) 花田賢太郎国立感染症研究所, 細胞化学部, 主任研究官 (30192701) 大賀洋子国立感染症研究所, 細胞化学部, 主任研究官 (50178000) 久下理国立感染症研究所, 細胞化学部, 室長 (30177977)
Keywords	SPT(セリンパルミトイルトランスフェラーゼ) / LCB1 / LCB2 / LPS / ホスフォリパーゼD / RhoA / ホスファチジルグリセロールリン酸 / カルジオリピン
Research Abstract	(1)出芽酵母のSPT活性に必須な遺伝子として二つの遺伝子LCB1およびLCB2が同定され、クローニングされているが、高等動物細胞のSPTに関する遺伝子は不明のままであった。そこで酵母LCB1産物にホモロジーを有する蛋白質をコードするcDNAをマウスおよびCHO細胞のcDNAライブラリーからクローニングし、それぞれmLCB1、cLCB1と名付けた。SPT活性の欠損したCHO細胞変異株(SPB-1株)にcLCB1を遺伝子導入すると、SPT活性およびスフィンゴ脂質生合成が正常レベルに回復した。また、タグ配列を付加したcLCB1蛋白質を発現したSPB-1株のSPT活性は、タグに対するアフィニティー樹脂に吸着することを示した。これらの結果から、cLCB1がSPTの構成因子をコードしていることが明きらかとなった。 (2)LPSはマクロファージ細胞表面のCD14を介してホスフォリパーゼDを活性化してPCからジグリセリドを産生するが、この上流にプロテインキナーゼCを介したRhoAの膜への移行があることを明らかにした。また、クルクミンが哺乳動物細胞のホスホリパーゼD活性を強く阻害することを見出し、クルクミンの抗炎症作用・抗発ガン作用はホスホリパーゼD活性を阻害することに起因する可能性を示した。 (3)CHO細胞のホスファチジルグリセロールリン酸合成酵素及びカルジオリピン合成酵素のcDNAのクローニングに成功した。

Research Products
(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] H.Yamamoto: "Involvement of diacylglycerol production in activation of nuclear factor-κB by a CD14-mediated lipopolysaccharide stimulus" Biochem.J.325. 223-228 (1997)
[Publications] M.Nishijima: "Mammalian cell mutants of membrane phospholipid biogenesis" Trends in Cell Biol.7. 324-329 (1997)
[Publications] O.Kuge: "Cloning of a Chinese hamster ovary(CHO)cDNA encoding phosphatidylserine synthase PSS)II,overexpression of which suppresses the phosphatidylserine biosynthetic defect of a PSS I-lacking mutant of CHO-K1 cells" J.Biol.Chem.272. 19133-19139 (1997)
[Publications] O.Kuge: "Phosphatidylserine synthase I and II of mammalisan cells" BBA. 1348. 151-156 (1997)
[Publications] H.Yamamoto: "Inhibitory effect of Curcumin on mammalian phospholipase D activity" FEBS Lett.417. 196-198 (1997)
[Publications] K.Hanada: "A mammalian homolog of the yeast LCB1 encodes a component of serine palmitoyltransferase,the enzyme catalyzing the first step in sphingolipid synthesis" J.Biol.Chem.272. 32108-32114 (1997)
[Publications] O.Kuge: "Control of phosphatidylserine biosynthesis through phosphatidylserine-mediated inhibition of phosphatidylserine synthase I in Chinese hamster ovary cells" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. (in press). (1998)

1997 Fiscal Year Annual Research Report

生体膜リン脂質の細胞内輸送とミクロドメインでの機能発現に関する遺伝生化学的研究

Principal Investigator

西島 正弘 国立感染症研究所, 細胞化学部, 部長 (60072956)

Research Products

[Publications] H.Yamamoto: "Involvement of diacylglycerol production in activation of nuclear factor-κB by a CD14-mediated lipopolysaccharide stimulus" Biochem.J.325. 223-228 (1997)

[Publications] M.Nishijima: "Mammalian cell mutants of membrane phospholipid biogenesis" Trends in Cell Biol.7. 324-329 (1997)

[Publications] O.Kuge: "Cloning of a Chinese hamster ovary(CHO)cDNA encoding phosphatidylserine synthase PSS)II,overexpression of which suppresses the phosphatidylserine biosynthetic defect of a PSS I-lacking mutant of CHO-K1 cells" J.Biol.Chem.272. 19133-19139 (1997)

[Publications] O.Kuge: "Phosphatidylserine synthase I and II of mammalisan cells" BBA. 1348. 151-156 (1997)

[Publications] H.Yamamoto: "Inhibitory effect of Curcumin on mammalian phospholipase D activity" FEBS Lett.417. 196-198 (1997)

[Publications] K.Hanada: "A mammalian homolog of the yeast LCB1 encodes a component of serine palmitoyltransferase,the enzyme catalyzing the first step in sphingolipid synthesis" J.Biol.Chem.272. 32108-32114 (1997)

[Publications] O.Kuge: "Control of phosphatidylserine biosynthesis through phosphatidylserine-mediated inhibition of phosphatidylserine synthase I in Chinese hamster ovary cells" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. (in press). (1998)

西島正弘国立感染症研究所, 細胞化学部, 部長 (60072956)