1996 Fiscal Year Annual Research Report

温度により遺伝子数が制御できる新規動物細胞遺伝子工学系による有用物質の効率的生産

Research Project

Project/Area Number	07555256
Research Institution	Nagoya University
Principal Investigator	飯島信司名古屋大学, 工学部, 教授 (00168056)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	西島謙一名古屋大学, 工学部, 助手 (10262891) 上平正道名古屋大学, 工学部, 助教授 (40202022)
Keywords	runaway-plasmid / episome / mammalian cells / genetic engineering / erythropoietin
Research Abstract	動物細胞を宿主とする遺伝子工学、特にヒトの細胞を用いる遺伝子工学はバイオ医薬品の生産にきわめて重要であるが、生産性が低いという欠点がある。申請者らは動物細胞の遺伝子工学で、微生物で通常用いられるマルチコピープラスミッドが開発されていないことが生産性の低さの原因のひとつであると考えている。そこで動物細胞で、温度により細胞あたりの遺伝子の数が変わり、ある温度で遺伝子の数が爆発的に増大し遺伝子産物が過剰に生産されるような便利なベクターを、DNAガンウイルスの一種であるサルSV40ウイルスを用いて開発した。SV40に基づく本ベクターが従来用いてきたサルCV-1細胞以外に、サルBSC-1、ヒトHela細胞でもたいへんよく機能し、培養温度を下げることにより遺伝子数を爆発的に増やすことができ、かつエリスロポイエチンの過剰生産も可能であることが判明した。一方、ヒトKB細胞では遺伝子数は温度により変化するものの、エリスロポイエチンの生産は温度に依存せず逆に37℃の方が高かった。また、スピナ-フラスコによる培養を行い、本宿主ベクター系がマイクロキャリアを用いた大量培養を想定した培養でもうまく働くことを実証した。さらにネズミなどげっ歯類ではたらく同様のベクターを構築するため、ポリオーマウイルスの複製に必須なミドルT抗原遺伝子に人工的に突然変異を導入し、温度によりコピー数がかわるベクターを構築した。

Research Products

(4 results)

All Other

All Publications (4 results)

[Publications] 飯島信司: "A new runaway type episomal vector for mammalian cells based on a temperature sensitive simian virus 40 and effective erythropoietin production" Applied Microbiology and Biotechnology. 41. 591-596 (1994)
[Publications] 飯島信司: "Inducible production of erythropoietin using new runaway type vector by mammalian cell culture in spinner flask" Journal of Fermentation and Bioengineering. 78. 483-485 (1994)
[Publications] 飯島信司: "Host range specificity of a novel runaway-type vector for mammalian cells" Journal of Fermentation and Bioengineering. 79. 360-362 (1995)
[Publications] 飯島信司: "A ts-SV40 based new mammalian plasmid vector and its copy number control by temperature change" The fifth international meeting of the Japanese Association for mimal Cell Technology. 5. 79-84 (1993)

1996 Fiscal Year Annual Research Report

温度により遺伝子数が制御できる新規動物細胞遺伝子工学系による有用物質の効率的生産

Principal Investigator

飯島 信司 名古屋大学, 工学部, 教授 (00168056)

Research Products

[Publications] 飯島 信司: "A new runaway type episomal vector for mammalian cells based on a temperature sensitive simian virus 40 and effective erythropoietin production" Applied Microbiology and Biotechnology. 41. 591-596 (1994)

[Publications] 飯島 信司: "Inducible production of erythropoietin using new runaway type vector by mammalian cell culture in spinner flask" Journal of Fermentation and Bioengineering. 78. 483-485 (1994)

[Publications] 飯島 信司: "Host range specificity of a novel runaway-type vector for mammalian cells" Journal of Fermentation and Bioengineering. 79. 360-362 (1995)

[Publications] 飯島 信司: "A ts-SV40 based new mammalian plasmid vector and its copy number control by temperature change" The fifth international meeting of the Japanese Association for mimal Cell Technology. 5. 79-84 (1993)

飯島信司名古屋大学, 工学部, 教授 (00168056)

[Publications] 飯島信司: "A new runaway type episomal vector for mammalian cells based on a temperature sensitive simian virus 40 and effective erythropoietin production" Applied Microbiology and Biotechnology. 41. 591-596 (1994)

[Publications] 飯島信司: "Inducible production of erythropoietin using new runaway type vector by mammalian cell culture in spinner flask" Journal of Fermentation and Bioengineering. 78. 483-485 (1994)

[Publications] 飯島信司: "Host range specificity of a novel runaway-type vector for mammalian cells" Journal of Fermentation and Bioengineering. 79. 360-362 (1995)

[Publications] 飯島信司: "A ts-SV40 based new mammalian plasmid vector and its copy number control by temperature change" The fifth international meeting of the Japanese Association for mimal Cell Technology. 5. 79-84 (1993)