ウシヘルペスウイルス1型をベクターとするウシ用組み換え多価ワクチンの開発

1997 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07556116
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 大塚 治城 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (80261957)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 小沼 操 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 教授 (70109510) ; 柴田 勲 全農家畜衛生研究所, 研究開発室, 主任調査役 ; 遠矢 幸伸 鹿児島大学, 農学部, 助教授 (30021702) ; 見上 彪 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (20091506)
• Keywords: BHV-1 / タイレリア / ピロプラズマ病 / P32 / ワクチニアウイルス / CHV / 狂犬病ウイルス / Gタンパク

Research Abstract

日本におけるウシの小型ピロプラズマ病の病原体であるTheileria sergentj原虫は千歳型と池田型の2種に大別される。原虫の主表面タンパクであるp32は宿主の免疫応答に最も重要な役割を持つと考えられているが、千歳型と池田型では異なった抗原性を示す。ウシピロプラズマ病に対する組み換えワクチンの開発を目標にして、千歳型および池田型のp32遺伝子をウシヘルペスウイルス1型(BHV-1)に組み込んだ組み換えBHV-1を作出した。BHV-1ゲノムに組み込んだP32の発現の効率を高めるために種々のプロモータを比較したが、現在までのところ外来のプロモータ(SV40,CMV,RSV等)はBHV-1内では良く機能しないことが明らかになった。BHV-1固有のearly,lateおよびdelayed lateプロモータを利用してp32遺伝子を発現できるが、組み換えワクチンとして用いるには発現量をさらに高める工夫が必要である。一方千歳型と池田型のp32遺伝子をワクチニアウイルスに組み込んだ組み換え体は十分な量のp32を発現した。これらの組み換えワクチニアをマウスに接種したところそれぞれ千歳型と池田型のp32に対する抗体が誘導された。小沼らにより近い将来ウシを用いて動物実験を行いワクチニア組み換え体がTheileria sergentiに対しての防御効果を研究する予定である。
イヌヘルペスウイルス(CHV)はイヌを宿主とするアルファヘルペスウイルスで幼弱の子犬に対しては毒性を有するが、成犬は抵抗性がある。平成9年度の研究で狂犬病ウイルス(RV)のGタンパク遺伝子をCHVに組み込んだ組み換えCHVを作出しこれがRVのGタンパクと同様の性質を持つものを発現することを示した。これをビ-グル犬の鼻腔内に接種するとRVに対する高い中和抗体を誘導した。組み換えCHV接種によって得られる中和抗体価は市販の不活化RVワクチンを通常の経路で接種して得られるものよりも高いことから、実用ワクチンとして使用可能と考えられた。

Research Products

• [Publications] Xuan,X., Tuchiya,K.et al.: "Biological and immunogenic properties of rabies virus glycoprotein expressed by ennine herpesivrus yeetor." Vaccine. (in press). (1998)
• [Publications] Xuan,X., Nishikawa,Y.et al.: "Rapid ckonstruction of canine herpesvirus vector expressing foreign genes using a LacZ-TK gene cassotte as a douhle selectional nurker" Virus Genes. (in press). (1998)