1996 Fiscal Year Annual Research Report
遺伝子導入によるロタウイルス高感受性細胞の樹立とその診断法への応用
Project/Area Number |
07556121
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Section | 試験 |
Research Institution | Gifu University |
Principal Investigator |
源 宣之 岐阜大学, 農学部, 教授 (10144007)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
杉山 誠 岐阜大学, 農学部, 助教授 (80196774)
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Keywords | 抗レセプター抗体 / 欠損VP4 / 遺伝子クローニング / ロタウイルス / シアル酸 / 牛乳ムチン / MA-104細胞 / 発現 |
Research Abstract |
1、まず、細胞レセプターに対応するウイルス構造蛋白質を同定することを目的に、トリロタウイルス、PO-13株の各構造蛋白質をコードする遺伝子のクローニングを行い、その塩基配列を決定した。また、クロニーングした遺伝子を用いて培養細胞内で発現させ、各種機能解析を行った。 (Arch,Virol.,1995. Vet.Microbiol.,1996. Arch.Virol.,1996. Virus Genes,in press Virus Res.,in press) 2、ロタウイルスに感受性のMA-104細胞の表面に存在するレセプターの性状をシアル酸分解酵素および各種ガングリオシドを用いて検討したところ、MA-104細胞上のロタウイルスレセプター分子にシアル酸の関与が示唆された。(Arch.Virol.,発表予定) 3、MA-104細胞上のロタウイルスレセプターに対するモノクローナル抗体をMA-104細胞を抗原とし、抗体の検出系として抗ロタウイルス抗体を用いて作出中である。 (第124回日本獣医学会、1997年10月 発表予定) 4、最近、牛乳および卵白中のムチンがロタウイルスと結合し、その感染増殖を阻止することが明らかにされた。そこで、ムチンにレセプターあるいはそれに類似の分子が存在するものと考え、ムチンに対するモノクローナル抗体の作出を試みている。 5、レセプターと結合するロタウイルス構造蛋白質の部位を特定するために、単独発現させた種々の欠損VP4のウイルス感染阻止能を調べている。(Virology,1995.)
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[Publications] Ito,H.,: "Sequence analysis of cDNA for the VP6 protein of group A avian rotavirus : a comparison with group A mammalian rotaviruses." Archives of Virology. 140. 605-612 (1995)
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[Publications] Rohwedder,A.,: "Sequnce analysis of pigeon,turkey,and chicken rotavirus VP8 identifies rotavirus 993/83,isolated from calf feces,as a pigeon rotavirus." Virology. 210. 231-235 (1995)
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[Publications] Ito,H.,: "Expression of the major inner capsid protein,VP6,of avian rotavirus in mammalian cells." Veterinary Microbiology. 49. 257-265 (1996)
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[Publications] Ito,H.,: "Mapping of antigenic sites on the major capsid protein of avian rotavirus using Escherichia coli expression system." Archives of Virology. 141. 2129-2138 (1996)
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[Publications] Rohwedder,A.,: "Bovine rotavirus 993/83 shows a third subtype of avian VP7 protein." Virus genes. (in press).
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[Publications] Ito,H.,: "Sequence analysis of the VP6 gene in group A turkey and chicken rotaviruses." Virus Research. (in press).
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[Publications] Sugiyama,M.,: "Characterization of the receptor on MA104 cells for avian rotaviruses" Archives of Virology. (発表予定).
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[Publications] 川村尚良、: "トリロタウイルスレセプターに対するモノクローナル抗体の作出" 第124回日本獣医学会(1997年10月). (発表予定).