1995 Fiscal Year Annual Research Report
パラフィン切片標本の蛍光画像解析による細胞機能解析法の試作開発
Project/Area Number |
07557022
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Research Category |
Grant-in-Aid for Developmental Scientific Research (B)
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Research Institution | Kyoto Prefectural University of Medicine |
Principal Investigator |
芦原 司 京都府立医科大学, 医学部, 教授 (30079719)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
村田 晋一 京都府立医科大学, 医学部, 助手 (20229991)
小西 英一 京都府立医科大学, 医学部, 助手 (50186714)
浦田 洋二 京都府立医科大学, 医学部, 講師 (30143944)
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Keywords | 顕微蛍光画像解析法 / 核DNA蛍光画像 / 癌細胞判定法 / FFT解析 / 多変量解析法 / 人工頭脳 / 確率的決定木 / 細胞周期 |
Research Abstract |
従来の試作開発研究に基づいてパラフィン切片標本に関する落射型顕微蛍光画像解析法-細胞機能解析法を研究した。(1)DNA蛍光染色-パラフィン切片標本に基づく癌細胞判定法に関して、自作ソフトを改良しつつ画像処理・画像解析した。(1)個々の核DNA蛍光画像のX軸方向・Y軸方向それぞれの最大径についてFFT解析してスペクトル解析値(SPV)の平均値を求める手続きを、多数のヒト胃癌・大腸癌症例の正常細胞・癌細胞(30個ずつ/症例)について行って正常細胞,癌細胞のグループとしてのSPVの平均値を求めておき、再び個々の細胞のSPVを用いてそれらが正常細胞群と癌細胞群の何れに相関度が高いかを解析して判定する方法を考案した。約100症例について、癌細胞は80%以上、正常細胞は90%以上の正答率を達成している。(2)乳癌について(ア)乳管内乳頭腫、(イ)非浸潤性乳管癌、及び(ウ)乳頭腺管癌を約20症例ずつ(100細胞/症例)蛍光画像解析し、計測パラメータ12種類に関して因子分析した。その結果、代表的な2種以上のパラメータを用いれば、細胞群として(ア)、(イ)、(ウ)を判別可能と判明した。(3)人工頭脳の一手法、確率的決定木法による癌細胞判定法を吉田幸司氏ら(ニコン、東工大・総合理工学研究科)と共同研究中で、属性の識別能力の局所性を考慮した新法を試作開発し、(1)で用いた胃癌・大腸癌症例の細胞個々について70-85%の正答率を得ている。さらに新しい癌細胞判定法も研究開発中で、諸法の性能比較から、最も有効な解析法を定めることをめざしている。(2)培養増殖細胞に関し、(ア)BrdUの短時間標識-FITC蛍光染色を行い、S期の進行に伴うDNA合成蛍光染色パターンの解析、(イ)核のPI-DNA蛍光測光から推定する細胞周期(G_1,S,G_2,M)に対応させた細胞骨格(α-チュブリン)のFITC蛍光染色像の形態特性解析も行っている。これらにより、細胞機能解析の一般化法をめざしている。
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Research Products
(8 results)
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[Publications] 村田晋一、寺内邦彦、浦田洋二、芦原 司: "免疫組織・細胞化学検査;9.特殊技術・応用 4)共焦点顕微鏡" 臨床検査. 39. 79-83 (1995)
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[Publications] Urata,Y.,Parmelee,S.J.,Agard,D.A.,Sedata,J.W.: "A three-dimensional structural dissection of Drosophila polytene chromosomes" J.Cell Biol.131. 279-295 (1995)
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[Publications] 浦田洋二、小西英一、村田晋一、芦原 司: "免疫組織・細胞化学検査;6.染色法 2)蛍光抗体法" 臨床検査. 39. 35-38 (1995)
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[Publications] 糸井啓純、芦原 司、他: "消化器癌の悪性度評価 (2)DNA Ploidy Patternの解析" 臨床消化器内科. 10. 1741-1748 (1995)
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[Publications] Kimura,H.,Ashihara,T.et al.: "Cytogenetic analyses of hepatocellular carcinoma by in situ hybridizaation with chromosome-specific DNA probe" Cancer. 77. 271-277 (1996)
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[Publications] Tsumura,H.,Ashihara,T.et al.: "Medical tele-education system with super high definition(SHD)image viewer" SPIE. 2663. 13-18 (1996)
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[Publications] 芦原 司、村田晋一、小西英一、浦田洋二: "組織細胞化学1995;(分担・共著)Morphometry" (日本組織細胞化学会 編)学際企画(東京), 8 (1995)
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[Publications] 浦田洋二、芦原 司: "新しい光学顕微鏡(第2巻)共焦点レーザ顕微鏡の医学・生物学への応用;(分担・共著)5.1)生細胞研究のための装置と方法" (藤田晢也監修;石川春律、高松哲郎編)学際企画(東京), 8 (1995)