1996 Fiscal Year Annual Research Report

受容体画像化定量システムを利用した神経伝達物質受容体研究方法の開発

Research Project

Project/Area Number	07557094
Research Institution	NAGASAKI UNIVERSITY
Principal Investigator	丹羽正美長崎大学, 医学部, 教授 (20136641)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	山下樹三裕長崎大学, 医学部, 助教授 (50192399) 重松和人長崎大学, 医学部, 助教授 (20154205) 谷山絋太郎長崎大学, 医学部, 教授 (70030898) 片岡泰文九州大学, 医学部, 助教授 (70136513)
Keywords	定量的受容体オートラジオグラフィー法 / in situハイブリダイゼーション法 / 定量液放射免疫組織化学法 / 受容体画像 / 神経伝達物質 / 受容体 / 中枢神経 / 神経細胞
Research Abstract	(1)定量的受容体オートラジオグラフィー法、(2)定量的放射免疫組織化学法、(3)in situハイブリダイゼーション組織化学法の三つの技法を組合せた受容体画像化定量システムを用いて、ラット脳内エンドセリン受容体について検索した。リガンド結合活性は、海馬錐体細胞層にはET_A、ET_Bともに全く存在せず、CA1上昇層にET_A受容体活性を認めた。小脳ではPurkinje細胞層にET_B活性を認めた。受容体オートラジオグラム上、海馬錐体細胞層は帯状の空白領域として観察されるのに対して、小脳Purkinje細胞層は帯状の高密度黒化領域として視認され対照的であった。^<35>S標識cRNAプローブを用いたin situ hybridization法では、ET_A mRNAが海馬錐体細胞層神経細胞体に認められ、上昇層には存在しなかった。小脳Purkinje細胞層では高密度なET_B mRNAがグリア細胞(Bergmann細胞)に観察され、Pukinje神経細胞体には認められなかった。ラット延髄下部では、area postrema,nucleussolitary tract,dorsal motor nucleus of vagus,hypoglossal nucleusにET_B活性が存在した。腹側では、lateral reticular nucleusに限局的に密着していた。nucleus spinal tract trigeminal nerveにも存在した。ET_A活性は、area postrema,nucleus solitary tract,dorsal motor nucleus of vagusに孤立的に検出された。ET_B mRNAは、ET_B活性の分布と一致していたが、発現量は必ずしも結合活性量と相関しなかった。ET_A受容体mRNAは、area postremaに限局的に認められた。以上、本定量システムの神経伝達物質受容体研究における有用性が明らかになった。

Research Products

(6 results)

All Other

All Publications (6 results)

[Publications] K.Shigematsu et al.: "Two subtypes of endothelin receptor and endothelin peptides are expressed in differential cell types of rat placenta : In vitro receptor autoradiographic and in situ hybridization studies" Endocrinology. 137. 738-748 (1996)
[Publications] M.Yoshimura et al.: "Localization of endothelin ET_B receptor on the myenteric plexus of guinea pig ileum and the receptor-mediated release of acetylcholine" British Journal of Pharmacology. 118. 1171-1176 (1996)
[Publications] S.Shibata et al.: "Endothelin ET_A receptor exists in the caudal solitary tract nucleus of the rat brain" Cellular and Molecular Neurobiology. (in press). (1997)
[Publications] S.Shibata et al.: "Endothelin receptors in rat pituitary gland" Cellular and Molecular Neurobiology. (in press). (1997)
[Publications] Y.Sakurai-Yamashita et al.: "Expression of endothelin receptors and nitric oxide synthase in the brain of stroke-prone spontaneously hypertensive rats with cerebral apoplexy" Brain Research. (in press). (1997)
[Publications] K.Shigematsu et al.: "Endothelin (ET) receptor binding sites and expression of ET mRNAs in the ral lower brainstem" Japanese Heart Journal. (in press). (1997)

1996 Fiscal Year Annual Research Report

受容体画像化定量システムを利用した神経伝達物質受容体研究方法の開発

Principal Investigator

丹羽 正美 長崎大学, 医学部, 教授 (20136641)

Research Products

[Publications] K.Shigematsu et al.: "Two subtypes of endothelin receptor and endothelin peptides are expressed in differential cell types of rat placenta : In vitro receptor autoradiographic and in situ hybridization studies" Endocrinology. 137. 738-748 (1996)

[Publications] M.Yoshimura et al.: "Localization of endothelin ET_B receptor on the myenteric plexus of guinea pig ileum and the receptor-mediated release of acetylcholine" British Journal of Pharmacology. 118. 1171-1176 (1996)

[Publications] S.Shibata et al.: "Endothelin ET_A receptor exists in the caudal solitary tract nucleus of the rat brain" Cellular and Molecular Neurobiology. (in press). (1997)

[Publications] S.Shibata et al.: "Endothelin receptors in rat pituitary gland" Cellular and Molecular Neurobiology. (in press). (1997)

[Publications] Y.Sakurai-Yamashita et al.: "Expression of endothelin receptors and nitric oxide synthase in the brain of stroke-prone spontaneously hypertensive rats with cerebral apoplexy" Brain Research. (in press). (1997)

[Publications] K.Shigematsu et al.: "Endothelin (ET) receptor binding sites and expression of ET mRNAs in the ral lower brainstem" Japanese Heart Journal. (in press). (1997)

丹羽正美長崎大学, 医学部, 教授 (20136641)