1996 Fiscal Year Annual Research Report
上皮・間葉相互作用による歯の形成・分化に関わる遺伝子の発現及び機能に関する研究
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07557112
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| Section | 試験 |
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| Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
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Principal Investigator |
田村 正人 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 助手 (30236757)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
二藤 彰 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 助手 (00240747)
野田 政樹 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 教授 (50231725)
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| Keywords | 歯 / 上皮・間葉相互作用 / 遺伝子発現 / アメロゲニン |
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| Research Abstract |
胎子13,16日といったいくつかの初期発生段階のマウスから歯胚を取り出し,上皮と間葉を分離させて培養した.この歯胚を上皮,間葉,上皮と間葉といった組み合わせで培養する再構成培養を確立した.これらの発生過程での上皮から間葉へ,間葉から上皮へシグナルを伝達する分子を明らかにすることを試みた.培養再構成組織を多数集め,totalRNAを抽出し,さらにpolyA-RNAを調製した.このpolyA-RNAを鋳型として逆転写酵素を用いcDNAを合成した.Differential Display法ならびにPCR法を用いた改良型の新たなサブトラクション等種々の方法を用いて,上皮から間葉へ間葉から上皮へシグナルを伝達する分子の候補となるcDNAを選択を行った.それらのなかでも,シグナルを伝達する分子の候補となるcDNAについては,DNAシークエンサーを用いて部分塩基配列の決定を行なうとともにデータベースを用い,既知の因子との相同性の有無ならびに相同性の程度の比較等を行なっており,その詳細な解析を進行している.
また,歯胚のエナメル形成に重要な機能を果たすと考えられているアメロゲニン遺伝子(マウス)の全長ならびに5'上流域6Kbのクローニングならびに全塩基配列の決定を行い,その構造を明らかにした.また種々のアメロゲニンプロモーターのレポータープラスミドを用いた転写調節機構に関する研究を行い,アメロゲニン遺伝子のエナメル芽細胞での特異的発現に関わる領域を明らかにした.今後,更にエナメル芽細胞での特異的発現に関わる因子等についても検討を加えていく予定である.
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[Publications] Masato Tomura: "Interleukin-1α stimulates interstitial collagenase gene expression in human dental pulp fibroblasts in culture" Journal of Endodontics. 22. 240-243 (1996)
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[Publications] Shigetaka Nagaoka: "Interleukin-8 gene expression by human dental pulp fibroblasts in cultures stimulated with prevotella intermedia Lipopolysaccharide" Journal of Endodontics. 22. 9-12 (1996)
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[Publications] Shigetaka Nagaoka: "β-adrenergic receptor kinase mRNA expression in human dental pulp" Journal of Japan Endodontics Association. 17. 162-166 (1996)
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[Publications] Kinichi Shionoya: "Relationship between transferin receptor expression and proliferating activity of tumor cells" Asian Journal of Oral and Maxilofacial Surgery. 8. 73-78 (1996)
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[Publications] Nobuko Mataga: "Establishment of a Novel Chondrocyte-Like Cell Line derived from transgenic mouse harboring the temperature-sensitive simian virus 40 Large T antigen" Journal of Bone and MIneral Research. 11. 1646-1654 (1996)
