1996 Fiscal Year Annual Research Report
DNA複製開始領域とウイルスベクターを組み合わせた遺伝子治療導入ベクターの開発
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07557147
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| Section | 試験 |
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
有賀 寛芳 北海道大学, 薬学部, 教授 (20143505)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
上田 正次 雪印乳業(株), 生物科学研究所, 主任研究員
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| Keywords | c-myc / DNA複製開始 / 結合タンパク質 / 癌遺伝子 |
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| Research Abstract |
1、c-myc遺伝子上のDNA複製開始領域を認識するタンパク質群
c-myc遺伝子上のDNA複製開始領域の必須配列,(H-P) core,にはMSSPと名付けたタンパク質群が結合し、そのスプライシングの違いによるMSSP-1-3, Scr2を既にcDNAクローニングした。MSSPはC-MYCのN末に結合し、複製活性を増強した。また、この(H-P)core plus鎖にはC-MYCそのものが結合することも判明した。更に、MSSP/C-MYC複合体はDNAポリメラーゼαと結合することがin vivo, in vitro系で明らかにした。DNAポリメラーゼαとMSSP-1が直接結合し、そこにC-MYCが結合する形となる。MSSP/C-MYC複合体はDNAポリメラーゼαのCと呼ばれるN末付近に結合した。この領域はSV40DNA複製開始においてSV40T抗原が結合する領域でありMSSP/C-MYC複合体とT抗原との機能的類似性が示唆された。また、MSSPは細胞周期のGl/S移行に主役をなすcdkとも複合体形成した。cdk2はGl/S移行に加え、S期開始即ちDNA複製開始に直接関与していることが最近明らかにされている。また、本研究の中で、MSSPはPCNAと、C-MYCはcdk2インヒビターであるp21と直接結合することも判明した。また、p21はcdk2、PCNAとそれぞれN末、C末で結合することが知られており、C-MYCはp21のC末でPCNAと拮抗的に結合した。以上を総合して考えると、C-MYC/MSSP複合体はGl/S境界領域ではcdk2/p21複合体に結合することでcdk2を活性化させS期開始のシグナルをあたえ、次にDNAポリメラーゼαがMSSP sideに結合し、実際の複製開始が起きる。次に、p21/C-MYC複合体にPCNAが参入し、C-MYCと拮抗的に作用してPCNA/p210cdk2複合体が形成され、そのPCNAにDNAポリメラーゼδが結合することで更なる複製が進むと考えられる。
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Research Products
(6 results)
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[Publications] Manabe, A: "Transcriptional repression activity of N-myc protein requires phosphorylation by MAP kinase." Biochem. Biophys. Res. Comm.219. 813-823 (1996)
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[Publications] Haigermoser, C.: "Cloning and characterization of the genomic DNA of the human MSSP gene." Nucleic Acids Res.24. 3856-3857 (1996)
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[Publications] Iida, M.: "Induction of apoptosis by MSSP, C-MYC binding proteins." Biol. Pharm. Bull. 20. 10-14 (1997)
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[Publications] Taira, T.: "A novel Gl/S-speciffic enhancer identified in the human heat shock protein 70 gene" J. Biol. Chem. (in press). (1997)
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[Publications] Tsuchiya, T.: "ku antigen binds to Alu family DNA and represses transcription." J. Biol. Chem.(in press.). (1997)
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[Publications] Maeda, J.: "AMY-1, a novel C-MYC binding proterin that stimulates transcription and transforming activities of C-MYC" Nature. (in press). (1997)
