1997 Fiscal Year Annual Research Report

腎毒性予測法の開発

Research Project

Project/Area Number	07557317
Research Institution	Kyorin University
Principal Investigator	遠藤仁杏林大学, 医学部, 教授 (20101115)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	細山田真杏林大学, 医学部, 助手 (00291659) 関根孝司杏林大学, 医学部, 助手 (50255402) 武田理夫杏林大学, 医学部, 講師 (40255401)
Keywords	近位尿細管直部 / 有機アニオン / ジカルボン酸 / トランスポーター / ジカルボン酸トランスポーター / 有機アニオントランスポーター / プロスタグランジン / β-ラクタム抗生物質
Research Abstract	平成8年度において、分子クローニングに成功した有機アニオントランスポーター(OAT1)のDNAシークエンス、組織分布、機能解析を実施した。 (1)OAT1の化学構造 OAT1はアミノ酸551個より成り、そのhydropathy plotより膜12回貫通型のタンパクであり、N末とC末は共に細胞質内に存在する。第一と第二の膜貫通の外側に位置する大きなループには4個のN-糖鎖結合部位が予測される。又第6と第7の膜貫通に連なる細胞質内ループにはC-キナーゼによるリン酸化部位の存在が予測された。 (2)組織分布ノザンブロットによりOAT1のmRNAは腎に強く、脳に弱く発現が認められ、他の臓器にはその発現は認められなかった。腎内では皮質に高く分布していた。C末端のペプチドに対する抗体による免疫組織化学染色では近位尿細管の基底側膜にOAT1の局在が認められた。 (3)機能解析 OAT1のcRNAをアフリカツメガエル卵母細胞に注入した発現系による機能解析では、^<14>C標識パラアミノ馬尿酸(PAH)の取り込みはジカルボン酸との交換輸送であった。Km値は14μMで、輸送基質は内因性物質としてはプロスタグランジン類、cAMP、cGMP、尿酸、ジカルボン酸等、外来性物質としては非ステロイド系抗炎症薬、β-ラクタム系抗生物質、利尿薬、抗腫瘍薬、抗痙攣薬、変換酵素阻害薬、マイコトキシン類などの多岐に及んでいた。以上のOAT1の新しい多選択性輸送機能から類推すると、OAT1は従来より存在が予測されていた腎の有機陰イオン輪送系の主要なトランスポーターである事が判明した。この遺伝子を強制発現させた培養細胞を用いて、各種薬物の腎毒性のスクリーニングが可能と思われる。

Research Products
(8 results)

All Other

All Publications (8 results)

[Publications] Kim,H.S.,Cha,S.K.,Abraham,D.G.,Cooper,A.J.L&Endou,H.: "Intranephron distribution of cysteine S-conjugate β-lyase activity and its implication for hexachloro-1,3-butadiene-induced nephrotoxicity on rats." Arch.Toxicol.71. 131-141 (1997)
[Publications] Nosaka,K.,Takahashi,T.,Nishi,T.,Imaki.,H.,Suzuki,T.,Suzuki,K.,Kurokawa,K.&Endou,H.: "An adenosine deaminase inhibitor prevents puromycin aminonucleoside Nephrotoxicity" Free Radical Biol.Med.22(4). 597-605 (1997)
[Publications] Takeda,M.,Kobayashi,M.,Osaki,T.,Shirato,I.&Endou,H.: "Staurosporine-induced apoptosis of immortalized mouse proximal tubule cells is modulated by BCL-2 expression level" Biochem.Mol.Biol.Int.42(4). 649-656 (1997)
[Publications] Sekine,T.,Wananabe,N.,Hosoyamada,M.,Kanai,Y.&Endou,H.: "Expression cloning and characterization of a novel multispecific organic anion transporter." J.Biol.Chem.272(30). 18526-18529 (1997)
[Publications] Takeda,M.,Kobayashi,M.,Shirato,I.,Osaki,T.&Endou,H.: "Cisplatin-induced apoptosis of immortalized mouse proximal tubule cells is mediated by interleukin-1β converting enzyme (ICE) family of proteases but inhibited by overexpression." Arch.Toxicol.71. 612-621 (1997)
[Publications] Utsunomiya-Tate,N.,Endou,H.,&Kanai,Y.: "Tissue specific variants of glutamate transporter GLT-1." FEBS Let.416. 312-316 (1997)
[Publications] Endou,H.,Kanai,Y.,Utsunomiya-Tate,N.&Hosoyamada,M.: "Contrib.Nephrol."Nutritional and acid-base aspects of amino acid metabolism"" Karger, 172 (1997)
[Publications] 長沢俊彦、河邉香月、伊藤克巳、浅野泰、遠藤仁: "Annual Review 腎臓 1998" 中外医学社, 239 (1997)

1997 Fiscal Year Annual Research Report

腎毒性予測法の開発

Principal Investigator

遠藤 仁 杏林大学, 医学部, 教授 (20101115)

Research Products

[Publications] Kim,H.S.,Cha,S.K.,Abraham,D.G.,Cooper,A.J.L&Endou,H.: "Intranephron distribution of cysteine S-conjugate β-lyase activity and its implication for hexachloro-1,3-butadiene-induced nephrotoxicity on rats." Arch.Toxicol.71. 131-141 (1997)

[Publications] Nosaka,K.,Takahashi,T.,Nishi,T.,Imaki.,H.,Suzuki,T.,Suzuki,K.,Kurokawa,K.&Endou,H.: "An adenosine deaminase inhibitor prevents puromycin aminonucleoside Nephrotoxicity" Free Radical Biol.Med.22(4). 597-605 (1997)

[Publications] Takeda,M.,Kobayashi,M.,Osaki,T.,Shirato,I.&Endou,H.: "Staurosporine-induced apoptosis of immortalized mouse proximal tubule cells is modulated by BCL-2 expression level" Biochem.Mol.Biol.Int.42(4). 649-656 (1997)

[Publications] Sekine,T.,Wananabe,N.,Hosoyamada,M.,Kanai,Y.&Endou,H.: "Expression cloning and characterization of a novel multispecific organic anion transporter." J.Biol.Chem.272(30). 18526-18529 (1997)

[Publications] Takeda,M.,Kobayashi,M.,Shirato,I.,Osaki,T.&Endou,H.: "Cisplatin-induced apoptosis of immortalized mouse proximal tubule cells is mediated by interleukin-1β converting enzyme (ICE) family of proteases but inhibited by overexpression." Arch.Toxicol.71. 612-621 (1997)

[Publications] Utsunomiya-Tate,N.,Endou,H.,&Kanai,Y.: "Tissue specific variants of glutamate transporter GLT-1." FEBS Let.416. 312-316 (1997)

[Publications] Endou,H.,Kanai,Y.,Utsunomiya-Tate,N.&Hosoyamada,M.: "Contrib.Nephrol."Nutritional and acid-base aspects of amino acid metabolism"" Karger, 172 (1997)

[Publications] 長沢俊彦、河邉香月、伊藤克巳、浅野 泰、遠藤 仁: "Annual Review 腎臓 1998" 中外医学社, 239 (1997)

遠藤仁杏林大学, 医学部, 教授 (20101115)

[Publications] 長沢俊彦、河邉香月、伊藤克巳、浅野泰、遠藤仁: "Annual Review 腎臓 1998" 中外医学社, 239 (1997)