1995 Fiscal Year Annual Research Report

新たなコレステロール代謝阻害薬の動脈硬化症治療の応用に関する研究

Research Project

Project/Area Number	07557342
Research Category	Grant-in-Aid for Developmental Scientific Research (B)
Research Institution	Hokkaido University
Principal Investigator	岡本洋北海道大学, 医学部・附属病院, 助手 (50260394)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	榊原順新潟大学, 医学部, 助手 (90242403) 小野輝夫新潟大学, 医学部, 教授 (00000927) 川口秀明北海道大学, 医学部, 教授 (70161297) 北畠顕北海道大学, 医学部, 教授 (00124769)
Keywords	コレステロール / 代謝阻害薬 / 動脈硬化症
Research Abstract	本研究の目的は、冠動脈硬化発症の予防のためコレステロールを効率よく、安全に低下させる薬剤を開発することである。本年度はコレステロール生合成後段階での代謝阻害方法を開発するために、ラットスクアレンエポキシダーゼ(RSE)を持つ酵母の組み替え体を作製しこれを用いて酵母のSEを特異的に抑制するterbinafine存在下に酵母のSEを抑制し種々な菌体成分の存在下での生育抑制を調べることによりRSEの阻害剤スクリーニング法の開発を行った。既知の抗真菌薬NB-598での予備実験から確立した設定条件がSE阻害剤スクリーニング法として十分機能していることを確認した。この方法を用いて既に804種類のサンプルをスクリーニングした結果transformantの成長%が20%以上生育抑制されているものが47種類、上記の性質のほかにhostの生育が80%を越えているものが25例検出され、この候補のなかからさらにRSEの阻害剤を同定するとともにヒトSEを持つtransformantについてのスクリーニングも計画中である。RSEのcDNAプローブにマウス、ヒトのcDNAクローニングを完了した。ORFでのホモロジーはラットに対しそれぞれ、92.8%、80.6%であった。基質結合部位はベンゾフェノンを用いたフォトアフィニテイー法とMALDT-MSにより3種のSEに共通な配列RHPLTGGGMTV近傍が有力と推定された。本酵素の遺伝子発現は培養細胞の実験でwestern、northern blottingともにリポ蛋白欠乏血清培地で増加し、転写レベルでSE発現が調節されていることが明らかにした。

Research Products
(7 results)

All Other

All Publications (7 results)

[Publications] Yoneya K: "Angiotensin-converting enzyme gene polymorphism in Japanese patients with hypertrophic cardiomyopathy." Am Heart J. 130. 1089-1093 (1995)
[Publications] Endo-Mochizuki Y: "Expression of renin and angiotensin-converting enzyme in human hearts." Heart and Vessels. 10. 285-293 (1995)
[Publications] Okada H: "Alteration of extracellular matrix in dilated cardiomyopathic hamster heart." Mol Cell Biochem,. (in press). (1996)
[Publications] Sakakibara J: "Molecular cloning and expression of squalene epoxidase." J Biol Chem. 270. 17-20 (1995)
[Publications] Kosuga K: "Nucleotide sequence of a cDNA for mouse squalene epoxidase." Biochim Biophys Acta. 1260. 345-438 (1995)
[Publications] Nakamura Y: "Transcriptional regulation of squalene epoxidase by sterols and inhibitors in HeLa cells." J Biol Chem. (in press). (1996)
[Publications] Kawaguchi H: "Heart hypertrophy and failure" The alteration of signal transduction system in heart failure., 463-473 (1995)

1995 Fiscal Year Annual Research Report

新たなコレステロール代謝阻害薬の動脈硬化症治療の応用に関する研究

Principal Investigator

岡本 洋 北海道大学, 医学部・附属病院, 助手 (50260394)

Research Products

[Publications] Yoneya K: "Angiotensin-converting enzyme gene polymorphism in Japanese patients with hypertrophic cardiomyopathy." Am Heart J. 130. 1089-1093 (1995)

[Publications] Endo-Mochizuki Y: "Expression of renin and angiotensin-converting enzyme in human hearts." Heart and Vessels. 10. 285-293 (1995)

[Publications] Okada H: "Alteration of extracellular matrix in dilated cardiomyopathic hamster heart." Mol Cell Biochem,. (in press). (1996)

[Publications] Sakakibara J: "Molecular cloning and expression of squalene epoxidase." J Biol Chem. 270. 17-20 (1995)

[Publications] Kosuga K: "Nucleotide sequence of a cDNA for mouse squalene epoxidase." Biochim Biophys Acta. 1260. 345-438 (1995)

[Publications] Nakamura Y: "Transcriptional regulation of squalene epoxidase by sterols and inhibitors in HeLa cells." J Biol Chem. (in press). (1996)

[Publications] Kawaguchi H: "Heart hypertrophy and failure" The alteration of signal transduction system in heart failure., 463-473 (1995)

岡本洋北海道大学, 医学部・附属病院, 助手 (50260394)