1996 Fiscal Year Annual Research Report
新しい理念に基づく総合的創傷治療薬の開発-腫瘍壊死因子の繊維芽細胞に対するNGF産生促進作用の応用
| Project/Area Number |
07557378
|
|---|
| Research Institution | Gifu Pharmaceutical University |
|---|
Principal Investigator |
河野 通明 岐阜薬科大学, 薬学部, 助教授 (00027335)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中里 紘 サントリー, 生物医学研究所, 部長
瀧川 雅浩 浜松医科大学, 医学部, 教授 (80115873)
林 恭三 岐阜薬科大学, 薬学部, 名誉教授 (00029935)
佐藤 仁彦 岐阜薬科大学, 薬学部, 助手 (00240945)
|
|---|
| Keywords | 腫瘍壊死因子 / 神経成長因子 / 創傷修復 / 繊維芽細胞 / インターロイキン-1 / 骨形成因子 / 受容体 / 末梢神経再生 |
|---|
| Research Abstract |
1. TNFの繊維芽細胞に対するNGF産生促進作用の細胞内シグナル伝達系に関しては、ERK MAPキナーゼ、p38 MAPキナーゼ、Cキナーゼ、Aキナーゼなどの関与を中心に、具体的には各キナーゼに対する特異的阻害剤を利用して解析した。その結果、TNFの繊維芽細胞に対するNGF産生促進作用は主に、上記キナーゼの直接的な関与がない未同定のシグナル系の活性化を介して誘起される可能性が示唆された。
2. NGF遺伝子の転写調節領域に関しては、転写開始点付近の約2kbpのフラグメントを単離し、このなかにTNFに応答する調節領域が含まれているかどうかを常法に従って解析したが、いずれのプラスミドを導入したNIH3T3細胞においてもTNF刺激によるレポーター遺伝子(β-ガラクトシダーゼ)の顕著な発現上昇は認められなかった。すなわち、今回解析した領域にはTNFによる調節領域が含まれていない可能性が示唆され、この点は今後の検討課題として残った。
3. in vivoでの末梢神経繊維再生に及ぼすTNFの効果を検討する目的で、II方糖尿病マウスの背部を剃毛後作製した全層切除創にTNF (0.1μg、1μg、10μg/cm^2、3〜4日毎)を滴下した。その結果、0.1μg/cm^2のTNFを投与した場合には、PBSを投与したコントロール群と比較して、術後11日および14日目の潰瘍面積の縮小率に有意な差が認められ、また14日では細胞浸潤が少なく、繊維芽細胞が増加し、成熟した肉芽の形成が認められ、さらに真皮内に神経繊維の再生が確認されるなど、創傷治癒に対する促進効果が認められた。一方、1μg/cm^2および10μg/cm^2のTNFを滴下した際には逆に潰瘍面積が拡大するなど、全く治癒傾向は認められなかった。すなわちTNFは組織損傷後の末梢神経再生において実際に重要な役割を果たしている可能性が示唆されたが、一方、その有効濃度領域は狭く、TNFを末梢神経再生促進剤として臨床応用するに際してはこの点に留意する必要性が示された。
|
-
[Publications] Iwasaki, S.: "Characterization of the Bone Morphogenetic Protein-2 as a neurotrophic factor. Induction of neuronal differentiation of PC12 cells in the absence of mitogen-activated protein kinase activation." J. Biol. Chem.271巻. 17360-17365 (1996)
-
[Publications] Hattori, A.: "Bone morphogenetic protein-2 is markedly synergistic with tumor necrosis factor in stimulating the production of nerve growth factor in fibroblasts." Biochem. Mol. Biol. Int.38巻. 1095-1101 (1996)
-
[Publications] Hattori, A.: "Tumor necrosis factor (TNF) stimulates the production of nerve growth factor in fibroblasts via the 55-kDa type 1 TNF receptor." FEBS Lett.379巻. 157-160 (1996)
-
[Publications] Nagamine, K.: "Dissociation of c-fos induction and MAP kinase activation from HGF-induced motility response in human gastric carcinoma cells." Eur. J. Biochem.236巻. 476-481 (1996)
-
[Publications] Sakakura, C.: "Induction of apoptosis by sphingosine, N, N-dimethysphingosine, and epidermal growth factor in solid tumor cells : A possible involvement of mitogen-activated protein kinase cascade in apoptotic signaling." Brit. J. Cancer. (in press). (1997)
