ヒトのリスク推定に資する太陽光紫外線曝露線量計の開発

1996 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 07558204
• Research Institution: Kanazawa University
• Principal Investigator: 石垣 靖人 金沢大学, 薬学部, 助手 (20232275)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 松永 司 金沢大学, 薬学部, 講師 (60192340) ; 鈴木 文男 広島大学, 原爆放射能医学研究所, 教授 (10019672)
• Keywords: 太陽光紫外線 / 紫外線線量計 / 紫外線誘発DNA損傷 / TDM-2抗体 / シクロブタン型チミン二量体

Research Abstract

我々はニトロセルロース膜上に固相吸着させたDNA中に太陽光紫外線によって誘発される損傷を定量的に検出することによって、太陽光中の有害紫外線線量を測定する系を開発することを試みた。測定には損傷特異的抗体TDM-2を用い、2次抗体に標識された酵素と基質の発色を定量化することによって紫外線被曝量を推定した。また、ニトロセルロース膜をフィルムでシリカゲルとともに密閉し、温度の変化に対応できる形態とした。オリエル社の太陽光シミュレーターを用いた照射実験では、発色ある線量域を超えてしまうと頭打ちになることが明らかとなった。紫外線をカットできるブルーポリエチレンフィルターで密封した結果、より高線量域まで測定が可能となった。また、このフィルターの透過性は温度に依存しないことを確認した。さらにDNA中に生成する損傷量は照射時の温度に依存しないことも確認した。紫外線照射後生成したDNA損傷は照射後さかのぼって22日間まで安定に保持され、保存によって損傷量が減少しないことが明らかとなった。また、DNAをニトロセルロース膜に吸着後、21日間まで保存しておいても照射によって生成する損傷量が低下しないことも確認した。以上の基礎実験から、屋外での使用に耐えうる程度に温度・湿度に対して安定であり、しかも作製してから少なくとも3週間程度は安定であり、太陽光曝露後も3週間はさかのぼって測定ができる測定系であることが判明した。しかも、試作した太陽光紫外線フィルムバッジは大きさが7×3cm程度の薄い封筒状の形態をしており、携帯に簡便なように作られている。以上より十分に実用に耐えうる太陽光紫外線フィルムバッジの確立に成功したと考えられる。

Research Products

• [Publications] Y.Ishigaki: "New immunodeficient mouse strains bred by introducing beige and xid mutations into the KSN nude strain." Laboratory Animal Science. 46. 418-424 (1996)
• [Publications] T.Matsunaga: "The replication protein RPA confers structure-specific endonuclease activities to the XPF-ERCC1 and XPG subunits of human DNA repair excision nuclease" Journal of Biological Chemistry. 271. 11047-11050 (1996)
• [Publications] AR.Young: "The in situ repair kinetics of epidermal thymine dimers and 6-4 photoproducts in human skin types I and II" Jounal of Investigative Dermatology. 106. 1307-1313 (1996)
• [Publications] M.Wakasugi: "Purification of a novel UV-damaged-DNA binding protein highly specific for (6-4) photoproduct" Nucleic Acids Research. 24. 1099-1104 (1996)
• [Publications] X.Qin: "Detection of ultraviolet photoproducts in mouse skin exposed to natural sunlight" Japanese Journal of Cancer Research. 87. 685-690 (1996)
• [Publications] S.Takahashi: "Determination of cyclobutane pyrimidine dimer in the DNA from UV-B irradated cucumber leaves" Environmental Science. 9. 461-466 (1996)
• [Publications] T.Itoh: "Rodent complementation group 8 (ERCC8) corresponds to Cockayne syndrome complementation group A" Mutation Research. 362. 167-174 (1996)
• [Publications] M.Ueda: "Higher cyclobutane pyrimidine dimer and (6-4) photoproduct yields in epidermis of normal humans with increased sensitivity to ultraviolet B radiation" Photodermatolgy Photoimmunology and Photomedicine. 12. 22-26 (1996)
• [Publications] Y.Takeuchi: "Induction and repair of damage to DNA in cucumber cotyedons irradated with UV-B" Plant Cell Physiology. 37. 181-187 (1996)
• [Publications] S.Nakamura: "Assembly and function of Chlamydomonas flagellar mastigonemes as probed with a monoclonal antibody" Journal of Cell Science. 109. 57-62 (1996)
• [Publications] T.Shimizu: "A specific chromosome change and distinctive transforming genes are necessary for malignant progression of spontaneous transformation in cultured Chinese hamster embryo cells" Japanese Journal of Cancer Research. 86. 546-554 (1995)
• [Publications] X.Qin: "Quantitative detection of ultraviolet light-induced photoproducts in mouse skin by immunohistochemistry" Japanese Journal of Cancer Research. 86. 1041-1048 (1995)
• [Publications] E.Eveno: "Different removal of ultraviolet photoproducts in genetically related xeroderma pigmentosum and trichothiodystrophy diseases" Cancer Research. 55. 4325-4332 (1995)
• [Publications] H.Nakane: "High incidence of ultraviolet-B or chemical-carcinogen-induced skin tumors in mice lacking the xeroderma pigmentosum groupA gene" Nature. 377. 165-168 (1995)
• [Publications] H.Yasutake: "Inhibitory effect of caffeine on potentially lethal damage repair in cisplatin-treated human osteosarcoma cells" Anticancer Research. 15. 831-837 (1995)
• [Publications] C.A.Chadwick: "The detection of cyclobutane thymine dimers,(6-4) photolesions and the Dewar photoisomers in sections of UV-irradiated human skin using specific antibodies,and the demonstration of depth penetration effects" Jpuranal of Photochemistry and Photobiolology-B. 28. 163-170 (1995)
• [Publications] P.H.Clingen: "Induction of cyclobutane pyrimidine dimers,pyrimidine (6-4) pyrimidone photoproducts,and Dewar valence isomers by natural sunlight in normal human mononuclear cells" Cancer Research. 55. 2245-2248 (1995)
• [Publications] P.H.Clingen: "Correlation of UVC and UVB cytotoxicity with the induction of specific photoproducts in T-lymphocytes and fibroblasts from normal human donors" Photochemistry and Photobiology. 61. 163-170 (1995)
• [Publications] 二階堂修: "抗変異原・抗発がん物質とその検索法(DNA修復の検出)" 講談社, 11 (1995)